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文献和实验疏水相互作用层析原理 疏水作用层析原理是根据生物分子的疏水性差异进行分离。当生物分子通过疏水作用层析介质的时候,生物分子的疏水基团与层析介质的疏水配基相互作用,之后通过降低缓冲液的疏水性来进行洗脱,从而使生物分子通过疏水作用产生分离,纯化获得目标样品。 特色 属于其他层析技术的互补技术 高选择性,特别适用于疏水性高的目的物分离纯化 由于需要高盐条件,易使蛋白沉淀、变性,因此其应用范围受限 属于吸附性层析类型,具有浓缩作用 操作环境的温度对层析过程及结果的影响较大 适于疏水性强的蛋白、耐
膜等)的表面相互摩擦,导致抗体抗原相互作用减弱,对于靶蛋白定量有较大的影响。 在实验过程中,经过逐渐摸索,发现一种新的方法抗原抗体孵育方法。 由于转印膜(PVDF膜等)为疏水性材质,可以将其与表面为疏水性的材质(石蜡膜parafilm等)放置在一起,将抗体滴加在转印膜表面,水平放置,于室温或者37摄氏度放置,进行抗原抗体反应。由于石蜡膜等材质的疏水性,致使抗体稀释液不会向转印膜的周围扩散,使滴加的抗体液一直保存于转印膜的表面,充分与抗原
象甲烷这样的碳氢化合物是难溶于水的,这是因为甲烷溶于水时,就会在其分子周围形成和冰一样结构的水,由于形成所谓的冰简,从而使熵减少。象蛋白质那样含有疏水残基和亲水残基的物质溶于水时,疏水基就包入到分子的内侧,通过露在外侧的亲水基结构,从而防止了熵的减少。因为在疏水基彼此间产生了一种结合力,所以称为疏水结合。疏水结合的产生是由于防止随着水熵的减少而使自由能增加而引起的,因而具有温度越高结合力越强的特征。对作为蛋白质三维结构的支持力,而疏水结合起着很大的作用。另外,肥皂等所以容易
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