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文献和实验检测自噬 marker LC3B(~14-17 kDa),则应避免使用 Cofilin 或 Cyclophilin B(~20 kDa)这些分子量与目标蛋白接近的内参蛋白。√ 表达水平:选择的内参蛋白需要在待测样本中是高表达的。常用的内参蛋白是由管家基因高表达的,是细胞发育和维持细胞活力所必须的。例如,细胞核的内参蛋白 PCNA,在 DNA S 期表达,因此对于非增殖细胞不推荐使用。√ 表达因素:选择表达不受实验变量影响的内参,例如,细胞应激反应中 HSP60 会表达上调,因此在研究细胞应激实验中
蛋白来源:肿瘤手术标本 蛋白名称(可保密):转录因子 蛋白分子量:33 KDa WB用膜类型、孔径:PVDF膜 转膜方式(恒压、恒流):350 mA 恒流 转膜时间:150 min 转膜设备:湿转 Bio-Rad 说明:相同条件曾用于数个30-70 KDa的蛋白,都能成功转上,不过没有试缩短时间效果
zhangqiang6612 最近做wb时,转膜后mark很淡,几乎没有 转膜条件:300mA,恒流 45min,分子量大小40kd 丽春红染膜后,条带很淡 转膜液配方:Tris 5.8g,甘氨酸2.9g,甲醇200ml/L,补足液体(去离子水)至1000ml 请高位高手指点 蓝天飞龙 有图吗? zhanghai123
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