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文献和实验bluesky0902 请教各位:为什么条带这么不清晰呢?而Marker还可以,是电泳的问题,胶的问题还是染色的问题呢?刚开始做,是在搞不明白~·电泳是非变性聚丙烯,染色步骤如下: 染色步骤: 1. 固定液:100%冰醋酸2ml,无水乙醇40ml加水至400ml,摇7-8min 2. 银染液:0.6g硝酸银加水至300ml,摇12-15min 3. 加水洗1-2次,每次1min
(一)石蜡切片IGSS(1)切片脱蜡至水。(2)0.1%胰蛋白酶37℃消化20min或抗原修复20min(98℃),自然冷却至室温。(3)0.05mol/L(pH7.4)TBS洗3×3min.(4)l%EA(卵蛋白)15min,不洗。(5)适当稀释的特异抗体室温4h或4℃孵育20h,或37℃孵育1h.(6)0.05m01/L(pH7.4)TBS洗3×5min.(7)0.02m01/L(pH7.4)TBS(内含0.1%BSA)洗10min.(8)1%EA 15min,不洗,1:10~1:20稀释
.(2)0.1%胰蛋白酶37℃消化20min,或抗原修复20min(98℃),自然冷却至室温。(3)0.05mol/L(pH7.4) TBS洗3×3min.(4)1%EA(卵蛋白)15min,不洗。(5)适当稀释的特异抗体室温4h或4℃孵育20h,或37C孵育30min.(6)0.05mol/L(pH7.4)TBS洗3×5min.(7)0.02mol/L(pH7.4)TBS(内含0.1%BSA)洗10min.(8)1%EA 15min,不洗,滴加PAGlonm 1:40稀释,室温1h,(9)0.05mo!/L(pH
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