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大量
- 供应商:
钰博生物
- 检测范围:
见说明书
- 检测方法:
酶联免疫
- 应用:
科研
- 样本:
血清/组织/尿液
1、小鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)检测试剂盒酶标分析过程中的注意事项
样本的检测是基于抗原抗体的反应,根据标准曲线,判定样本最终的药物含量。它要求加样的准确性和洗板的一致性。在整个加样的过程中注意实验室温度的恒定,保证反应在试剂盒所示的温度下进行。
2常见加样方式
A、吸一打二
B、吸二打一
在实际操作过程中,提倡用“吸二打一”用这种方式,有如下几个好处:
a、加样过程中在板孔内不出现或者很少出现气泡
b、提高加样速度,缩短前后样本反应的时间差。
在加样的过程中还应细心注意避免出现下列现象:
A、加样的过程中漏加或者重加;
B、加样的过程中忘记更换吸头;
C、样本的重加或者漏加;
D、忘记记录样本的加样顺序。
3小鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)检测试剂盒常见的洗板方式
A、洗板机洗板;
B、多道孔加样器洗板;
C、多孔吸头洗板;
在洗板的过程中,确保每孔所加洗涤液量的均一,按说明书操作,不可过多,避免溢出板孔,污染其它样本;过少,则达不到洗涤的效果,容易出现曲线不成线性,花板等情况。
4 甩板
快速甩尽板孔内的液体,防止板孔里的液体对流或反溅回板孔中产生交叉污染。
5拍板
轻轻的在吸水纸上扣干板孔内的液体,而且吸水纸只能使用一次。
6 显色
值得注意的是,并非试剂盒中所规定的显色时间是绝对的,因为小鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)检测试剂盒的吸光度值会受环境中的温度、湿度、酶标板反应时所接触到的物品的导热度等有关,实验操作人员在加完显色液后,可根据颜色的深浅适当的延长或者缩短显色时间。防止出现吸光值接近或高于酶标仪的最高检测灵敏度(OD值在2.5-3.0之间),这样会间接影响到检测结果,如出现曲线前半部份梯度不明显或颠倒数值等现象,也就造成了一些假阳性或部分检测结果偏低的现象。
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文献和实验化的平衡失调与肿瘤发生和癌症进展有关。 酶调节 乙酰基被组蛋白乙酰转移酶 (HAT) 添加到组蛋白 H3 和 H4 的赖氨酸残基上,并被去乙酰化酶 (HDAC) 除去。组蛋白乙酰化主要靶向启动子区域,称为启动子局部乙酰化。例如,组蛋白 H3(H3K9ac 和 H3K27ac)上 K9 和 K27 的乙酰化通常与活性基因的增强子和启动子有关。转录基因中也发现了 低水平的整体乙酰化,但其功能尚不清楚。 甲基化 组蛋白 H3 和 H4 的赖氨酸或精氨酸残基被甲基化,对转录有不同的影响。精氨酸甲基
或抑制。 呵呵:a open question Fasta921 可不可以这么理解: 1、Oct4作为转录因子,与Sox2、Klf4等转录因子结合后激活转录。 2、下面的HD AC及PcG相当于Oct4阻遏蛋白,HD AC、PcG与Oct4结合后阻止了Oct4与其相应的转录因子结合从而抑制转录! Fasta921 A: activating funtion of Oct4, Klf
) 用乙酰辅酶 a 的乙酰基取代氨基酸。这种类型的乙酰化是共翻译的,因为 N 端在仍与核糖体相连的生长中的多肽链上乙酰化。虽然 80 至 90% 的真核细胞蛋白以这种方式乙酰化,但其确切的生物学意义仍不清楚。组蛋白 N 末端赖氨酸的ε-NH2 乙酰化(简称赖氨酸乙酰化)是调节基因转录的常用方法。组蛋白乙酰化是一个可逆的事件,可减少染色体浓缩以促进转录,这些赖氨酸残基的乙酰化受含有组蛋白乙酰转移酶 (HAT) 活性的转录因子调控。而具有 HAT 活性的转录因子作为转录共激活因子,组蛋白去乙酰化酶
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