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一般描述
单克隆抗泛细胞角蛋白(小鼠IgG1和IgG2a同种型)是一种来自以下克隆的单克隆抗体的混合物:C-11、PCK-26、CY-90、KS1A3、M20和A53-B/A2。细胞角蛋白,包括至少29种不同的蛋白质,是上皮细胞和单核细胞的特征蛋白。细胞角蛋白1(68 kDa)、4(59 kDa)、5(58 kDa)、8(52 kDa)和6(56 kDa)是在角化的上皮细胞、非角质化的鳞状上皮、分层的上皮、简单上皮、以及在具有自然或病理转换的组织中表达的II型中性至碱性亚家族的成员。细胞角蛋白10(56 kDa)、13(54 kDa)和18(45 kDa)分别是在角化上皮、非角化分层鳞状上皮和简单上皮细胞中表达的I型酸性亚家族的成员。细胞角蛋白肽19(40 kDa)是一种I型角蛋白,可以在特定位置的分层上皮的简单细胞和宽细胞中表达。
特异性
这是单克隆抗细胞角蛋白抗体的混合物。识别人细胞角蛋白 1,4,5,6,8,10,13,18 和 19。它是一种广谱试剂,可与多种正常、反应性和肿瘤性上皮组织发生特异性反应。抗体混合物与简单、角化和非角化鳞状上皮和假复层上皮细胞反应。不与非上皮正常人体组织反应。蛋白水解处理后观察到染色强度增加(蛋白酶揭盲)。
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文献和实验的细胞群所产生的,所以它的免疫球蛋白属同一类型,质地纯一,而且它是针对某一抗原决定簇的,因此特异性强,亲合性也一致。单克隆抗体(McAb)的特性和常规血清抗体的特性比较见2-3。 表2-3 单克隆抗体(McAb)和常规免疫血清抗体的特性比较 单克隆抗体的制备方法如下。 (一)动物的选择与免疫 1.动物的选择 纯种BALB/C小鼠,较温顺,离窝的活动范围小,体弱,食量及排污较小,一般环境洁净的实验室均能饲养成活。目前开展杂交瘤技术的实验室多选用纯种BALA
(1)体内诱生法 取Balb/c小鼠,首先腹腔注射0.5 ml液体石腊或降植烷进行预处理。1-2周后,腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周,可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可获得大量单克隆抗体。 (2)体外培养法 将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中,杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。近年来,各种新型培养技术和装置不断出现,大大提高了抗体的生产
一、单克隆抗体的概念 抗体是机体在抗原刺激下产生的能与该抗原特异性结合的免疫球蛋白。常规的抗体制备是通过动物免疫并采集抗血清的方法产生的,因而抗血清通常含有针对其他无关抗原的抗体和血清中其他蛋白质成分。一般的抗原分子大多含有多个不同的抗原决定簇,所以常规抗体也是针对多个不同抗原决定簇抗体的混合物。即使是针对同一抗原决定簇的常规血清抗体,仍是由不同B细胞克隆产生的异质的抗体组成。因而,常规血清抗体又称多克隆抗体(polyclonal antibody),简称多抗。由于常规抗体的多克
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