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大量
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钰博生物
- 检测范围:
见说明书
- 检测方法:
酶联免疫
- 应用:
科研
- 样本:
血清/组织/尿液
1、甲胎蛋白检测试剂盒酶标分析过程中的注意事项
样本的检测是基于抗原抗体的反应,根据标准曲线,判定样本最终的药物含量。它要求加样的准确性和洗板的一致性。在整个加样的过程中注意实验室温度的恒定,保证反应在试剂盒所示的温度下进行。
2常见加样方式
A、吸一打二
B、吸二打一
在实际操作过程中,提倡用“吸二打一”用这种方式,有如下几个好处:
a、加样过程中在板孔内不出现或者很少出现气泡
b、提高加样速度,缩短前后样本反应的时间差。
在加样的过程中还应细心注意避免出现下列现象:
A、加样的过程中漏加或者重加;
B、加样的过程中忘记更换吸头;
C、样本的重加或者漏加;
D、忘记记录样本的加样顺序。
3甲胎蛋白检测试剂盒常见的洗板方式
A、洗板机洗板;
B、多道孔加样器洗板;
C、多孔吸头洗板;
在洗板的过程中,确保每孔所加洗涤液量的均一,按说明书操作,不可过多,避免溢出板孔,污染其它样本;过少,则达不到洗涤的效果,容易出现曲线不成线性,花板等情况。
4 甩板
快速甩尽板孔内的液体,防止板孔里的液体对流或反溅回板孔中产生交叉污染。
5拍板
轻轻的在吸水纸上扣干板孔内的液体,而且吸水纸只能使用一次。
6 显色
值得注意的是,并非试剂盒中所规定的显色时间是绝对的,因为甲胎蛋白检测试剂盒的吸光度值会受环境中的温度、湿度、酶标板反应时所接触到的物品的导热度等有关,实验操作人员在加完显色液后,可根据颜色的深浅适当的延长或者缩短显色时间。防止出现吸光值接近或高于酶标仪的最高检测灵敏度(OD值在2.5-3.0之间),这样会间接影响到检测结果,如出现曲线前半部份梯度不明显或颠倒数值等现象,也就造成了一些假阳性或部分检测结果偏低的现象。
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文献和实验时样本之间干扰。 Q:说明书上写细胞量为 1~5 × 105 ,细胞量多的话对检测结果有没有影响? A:建议细胞量最多不要超过 106个,过量的细胞相当于染料被稀释,影响染色和分离效果。一般 2×105 个细胞足够进行凋亡检测了,通常情况下检测 10,000 个细胞就能得到比较好的结果。 Q:是否可以用 PBS 替代凋亡试剂盒里面的 Binding Buffer? A:不行,Binding Buffer 是必须要加的,Annexin V 与 PS 的结合依赖 Ca2+,Binding
化作用——氧分子、过氧化氢、氧自由基 5. 表面活性剂和去污剂 6.变性剂——脲和盐酸胍、高浓度盐、螯合、有机溶剂 7. 重金属离子和巯基试剂 8. 热 9. 机械力 10. 冷冻和脱水 11. 辐射 5. 酶活计算 ① 酶活定义 酶的活力单位:酶的1个活力单位是在该酶的最适条件下,在25℃、1 min内催 1μmol的底物转化为产物的酶量。 ② 定时法的计算 将酶与底物在特定条件下孵育,酶促反应开始进行,经过一定时间后,用终止液终止反应,通过化学或生物化学的方法测出底物或产物的总变化量,除以时间即可
针对同一指标,生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗?
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律,但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应,其反应过程可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图,如下所示: 延迟区:无规律可寻。 等速区:对应的是速率法,一般应用于酶活力的检测。 过渡区:对应的是固定时间法,目的是解决某些化学反应的非特异性问题,提高准确度。 平衡区:对应的是终点法,主要是测定某物质在样本中的含量。 目前
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