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- 英文名:
组织亚细胞蛋白分馏试剂盒
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嵘崴达
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- 规格:
1 个试剂盒
组织亚细胞蛋白分馏试剂盒
货号: 87790
用于组织的 Thermo Scientific 亚细胞蛋白分离试剂盒包括在 2 小时内对 5 种不同细胞区室中的蛋白进行细胞分离和富集所需的所有试剂和组织过滤器。
用于组织的亚细胞蛋白分离试剂盒的特点:
•优化—针对组织分离的特定配方和方案
• 全套—使用单一试剂盒获得细胞质、膜、可溶性核、染色质结合和细胞骨架蛋白组分
• 时间高效—在约 2 小时内无需超速离心即可提取功能蛋白组分
• 便利—独特的组织过滤器可快速去除组织碎片
• 兼容—使用用于下游应用(如 Western 印迹蛋白检测、蛋白免疫印迹分析、电泳迁移率变动实验、报告基因和酶活性测定)的提取物。
•通用—从各种组织类型(包括肝脏、心脏、脑、肾、肺和脾脏)中提取蛋白
应用:
•从相同组织样品中获得细胞质、可溶性核、染色质结合、膜和细胞骨架蛋白
• 针对细胞质、核、膜和细胞骨架中的蛋白,扼要描述疾病状态与正常组织
• 研究组织中蛋白转位
| 87790 | 组织亚细胞蛋白分馏试剂盒 | 115 mL |
| 87791 | Pierce Tissue Strainers, 250µm, 2.5mL | 50 UNITS |
| 87792 | N-PER Neuronal Protein Extraction Reagent | 100 mL |
| 87793 | Syn-PER Synaptic Protein Extraction Reagent | 100 mL |
| 88013 | Nitrocellulose Membrane, 0.2µm, 7.9cm x 10.5cm | 15/PKG |
| 88014 | Nitrocellulose Membrane, 0.45µm, 7.9cm x 10.5cm | 15/PKG |
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文献和实验经5-6个倍增周期后,稳定同位素标记的氨基酸完全掺入到细胞新合成的蛋白质中替代了原有氨基酸。不同标记细胞的裂解蛋白按细胞数或蛋白量等比例混合,经分离、纯化后进行质谱鉴定,根据一级质谱图中两个同位素型肽段的面积比较进行相对定量,属于体内代谢标记法。SILAC属于体内标记技术,更接近样品真实状态,标记效率高达100%,且标记效果稳定,不仅适合于进行全细胞蛋白分析,还适合于膜蛋白的鉴定和定量,每个样本只需要几十微克的蛋白量。SILAC定量适用于活体培养细胞的分析,对多个样品或同一样品不同条件下全细胞蛋白或亚细胞蛋白
。 图 1. 富集质膜组分后检测跨膜蛋白更易检出:目的蛋白 SGL1 是跨膜蛋白,使用总膜蛋白检测困难,使用柱式法质膜及细胞组分分离试剂盒富集质膜后再检测质膜组分,可以显著提高 SGL1 的检出效率。 (图片来源:Kashiwagi Y,2015,PLoS ONE 10(6):e0130605. doi:10.1371/journal.pone.0130605.) (3)有条件诱导目的蛋白表达 如果通过增溶目的蛋白或分离亚细胞结构富集目的蛋白,仍无法得到 WB 条带,可通过查阅相关
分离后通过免疫沉淀或免疫印迹检测细胞内特定蛋白质的移动。例如,对某个细胞系中某个对质膜蛋白转运有影响的特殊因子感兴趣,可以用这个因子处理细胞,处理后的细胞通过离心富集。然后将处理过的细胞和没有处理过的细胞分别分离成不同组分。许多传统方法和商业试剂盒可以将细胞/组织分离成亚细胞结构例如胞浆,质膜,细胞器和细胞核。通过使用特异性抗体免疫印迹对比目标膜蛋白的分布。这种研究方法的基本要求是分离出的亚细胞组份必须相对干净。在市场上有许多细胞组分分离试剂盒,但是通常都具有显著的交叉污染,所以仔细选择细胞组分分离试剂盒
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