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嵘崴达
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100 张
Western 印迹滤纸,0.83 mm 厚,7 x 8.4 cm
货号: 84783
产品描述
Thermo Scientific™ Pierce Western 印迹法滤纸是预切割的棉滤纸片,适用于湿转或半干转、被动或电泳法,用于将蛋白质从聚bing烯酰胺凝胶 (SDS-PAGE) 转移至 PVDF、硝酸纤维素或其他膜上。
上海嵘崴达实业有限公司,专业经营生命科学领域的科研试剂、仪器和实验室消耗品,
致力于向国内生命科学研究人员提供合格产品和完善服务。
主要经营的试剂品牌:
Roche试剂,部分常用现货,周三定货,2-3周到货。
GE试剂,耗材,部分常用现货,周二,周五定货,3周左右。
SIGMA试剂,周一,五定货,3周左右到货。
THERMO试剂,部分现货,周三定货,2-3周到货。
ABCAM试剂,国内现货三天左右,期货四周左右。
Peprotech试剂,部分常用现货,周三定货,2-3周到货。
罗氏原料,请来电来邮咨询。
OXOID,BD培养基货期八周左右,部分现货。
MCE激动剂,ACROS、ALFA、阿拉丁等生化试剂现货定购。
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文献和实验Tris(PH=6.8) 10% SDS 40 µl 10% ammonium persulfate 40 µl TEMED 7 µl C. Preparation of gel 1. Assemble the glass plates and spacers (0.75 mm thick). 2. Pour the running gel to about 1 cm below the wells of the comb (~3.2 ml). 3. Seal with 1 ml
。2、实验步骤: (1)蛋白样品制备:用细胞裂解液抽提蛋白,并测蛋白浓度。 (2)取1 mg 蛋白进行SDS-PAGE。 (3)转膜:(转膜缓冲液4 ℃ 预冷备用,冷却装置于- 80 ℃ 冰箱冷冻备用)。 (4)将2 张海绵垫、2 张滤纸、转膜夹子及玻棒浸泡在盛转膜缓冲液的铝盒中。 (5)戴上手套,剪一张与凝胶尺寸相近的PVDF 膜(83 mm × 75 mm),左上角剪一缺口作为标记,浸泡在盛有20 mL 甲醇的平皿中约15 sec,直到膜变半透明。用纯水冲洗膜2 次。浸泡在盛转膜
蛋白分子量:30 kDa WB用膜类型、孔径:NC, 6x8 cm, 0.45 um 转膜设备:Invitrogen 湿转,外层冰水浴冷却。 转膜方式(恒压、恒流):恒流170 mA 转膜时间:根据胶的厚度而定,每0.5 mm转30 min, 1.5 mm的超厚预制胶转1.5-2 h。 转膜液的配制:10 mM碳酸氢钠,3 mM碳酸钠,20%甲醇。 建议改进方向:已考染的胶脱色后可以用此法转膜,条带稍淡但不影响结果。 蛋白
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