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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1000盒
- 供应商:
上海沪震
- 检测范围:
见说明书
- 检测方法:
酶联免疫
- 应用:
科研
- 适应物种:
猪
- 样本:
血清/组织/尿液
- 规格:
96T/48T
检测动物种类:
人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、山羊、鹅、鸡、虾、河蟹、鲈鱼、斑马鱼等
检测标本类型:
血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液、唾液、关节滑液、肺泡灌洗液等
检测指标:
趋化因子、生长因子、抑制因子、炎症因子、营养因子、脂肪因子、血管生成因子、动脉粥样硬化因子、基质金属蛋白酶等
实惠点:
原装进口分装:专业的技术支持,可靠的实验结果,优秀的产品质量,
高灵敏度、高精密度,高重现性,高特异性。不仅有高可靠性的实验结果,更为您节约实验成本和时间。
技术服务:
从标本采集、保存、预试验、实验、数据分析等全实验过程提供专业全面的技术指导
[需自备的设备及试剂]
1、450±10nm 滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2、单道或多道微量加液器及吸头
3、稀释样品的EP 管
4、蒸馏水或去离子水
5、吸水纸
6、盛放洗液的容器
[标本的采集与保存]
1、血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2 小时或4oC 过夜,然后1000×g 离心20 分钟,取上清即
可,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。
2、血浆:用EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30 分钟内于2-8oC 1000×g 离心15 分钟,
取上清即可检测,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。
3、组织匀浆:
1) 取适量组织块,于预冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,称重后备用(组织块较大需先剪碎后再匀浆);
2) 可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果:首先将组织块移入玻璃匀浆器,加入5-10mL 预冷PBS 进行充分研磨,该过程需在冰上进行(有条件实验室可选用机器匀浆);得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融进一步处理(超声破碎过程中注意冰浴降温;反复冻融法可重复2 次)。
3) 将制备好的匀浆液于5000×g 离心5 分钟,留取上清即可检测。
4、其它生物标本:请1000×g 离心20 分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。
注意:
1、以上标本均需密封保存,4oC 保存应小于1 周,-20oC 不应超过1 个月,-80oC 不应超过2 个月。
2、标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
3、标本使用前应缓慢均衡至室温,不应加热使之融解。
[标本处理]
1、本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。
2、实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L 的PBS 稀释(PH=7.0-7.2)。
3、若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。
4、使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA 实验结果偏差。
5、若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。
6、某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。
7、建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。
[说明]
1、由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。
2、最终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的标本备份。
3、不同批次的同一产品可能会有少许差别,如:检测限、灵敏度以及显色时间等,请依据试剂盒内说明书进行
4、只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到最佳的检测结果。
5、在储存及温育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
6、刚开启的酶联板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。请勿提前将酶标板从包装袋里拿出。
7、由于操作者不熟练、操作失误或读数仪程序选用错误等有可能会导致错误结果的产生。请使用者使用该产品前仔细阅读说明书,调试好酶标仪,请使用配备有450±10nm 滤光片的酶标仪,且该酶标仪测量范围在0.001-3.000 O.D.或以上。
8、同一使用者在使用同一产品时,如不同时间订购,也可能会因不同批次的少量差异产生不同结果,因此建议使用者在每次使用前均进行预实验。
9、试剂盒在出厂前均经过严格检测,但由于运输条件及各实验室条件差异,可能会造成实验结果与出厂结果不一致或不同批次试剂盒批间差大的情况,对于这种情况会酌情处理。
10、本试剂盒未与其他厂家同类试剂盒或不同方法检测同一目的蛋白的产品做对比,平行检测可能会存在检测结果不一致的情况。
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文献和实验,趁热分装,分装后放在4度,不要冰冻。 问:明胶消毒之后可以放置多长时间?还是现配现用呢?你说的分装是指直接铺在培养瓶吗?如果不是的话,放在4度冰箱不是已经固定了吗?固定之后有怎么铺在培养瓶呢?因为是没做过实验所以很不明白。 答:sigma 有现成的终浓度是2%的明胶,已消毒,买来即可使用,方便而且不贵,仅100多块钱。4度时明胶是胶冻状,室温下放置20-30分钟就可变成液态,说明书上建议使用的包被密度是5-10ug/cm2。 国产明胶就可以的,用去离子水配成1%即可。可以一次配50
6-sulfonic acid),2,2'-连氮基-双(3-乙基苯并噻吡咯呆-6磺酸)。6、96孔ELISA板。7、0.15mol/L,pH7.4 PBS:配其它液体用。8、包被缓冲液: 0.05mol/L,pH9.6 Na2CO3-NaHCO3缓冲液。9、洗涤液: 0.05%Tween 20-PBS。10、稀释液:4%PEG-洗涤液(用于稀释标准品和酶标抗体)。11、底物缓冲液:0.1mol/L,pH5.0柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液。12、3%H2O2。13、血清、枸缘酸盐或EDTA抗酸血浆、其它体液及细胞
反应20分钟后,洗板5次,洗板操作同步骤4。 6.显色和终止反应:将底物A、B液各50ul(或1滴)加到反应孔内,37℃避光显色10分钟。每孔加入终止液50ul(或1滴)混匀终止反应。 【结果判定】 1.酶标仪设定波长450nm,先用空白调零,然后测定各孔OD值;如果选用双波长测定,不必设置空白对照孔。 2.当阴性对照平均OD值小于0.08,阳性对照(pc)OD值大于0.30时,说明试剂盒有效且实验操作正确,否则应当重复
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