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- 英文名:
Pierce™ c-Myc-标签 IP/Co-IP 试剂盒
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- 供应商:
嵘崴达
- CAS号:
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- 规格:
1 个试剂盒
Pierce™ c-Myc-标签 IP/Co-IP 试剂盒
货号: 23620
Thermo Scientific Pierce c-Myc 标签 IP/Co-IP 试剂盒可提供使用 c-Myc-标签蛋白作为诱饵蛋白轻松进行免疫沉淀 (IP) 或免疫共沉淀 (co-IP) 实验所需的亲和树脂和其他试剂。
c-Myc 肽 (EQKLISEEDL) 已成为广泛用于哺乳动物重组蛋白表达的融合标签。此试剂盒包括交联微珠状琼脂糖,其上面共价固定了一种具有高度特异性的抗 c-Myc 抗体。与含有标签融合蛋白的样品共同孵育后,在琼脂糖微珠上捕获到包含 c-Myc-标签诱饵蛋白的相互作用复合物。在经过简单清洗步骤后,特定的蛋白质相互作用复合物在提供的洗脱缓冲液或SDS-PAGE样本载入缓冲液中被很容易的从树脂上洗脱,以便之后进行分析。此试剂盒包括已制备的琼脂糖亲和树脂、缓冲液、微量离心柱、阳性对照和易于遵循的说明。
c-Myc-标签 IP/Co-IP 试剂盒的特点:
•特异性—固定化抗 c-Myc 单克隆抗体可高特异性结合 c-Myc 抗原决定簇标签,从而提供高得率免疫沉淀产物及干净的 Western 印迹检测
•高容量—在 IP 模式下,对阳性对照裂解物使用低至 1 µg 抗 c-Myc 抗体即可获得出色的结果
•严格—试剂盒包含一种含有过表达 GST-c-Myc 的阳性对照裂解物,用于验证试剂和特定方案以及提供计划其他对照品的提示的说明书
•稳健—亲和系统与各种细胞裂解物的 IP 或 Co-IP 及生理(非变性)缓冲液系统兼容
• 简单、便利—全套试剂盒包括所有必要试剂、便利的离心柱和易于遵循的说明
| 23620 | Pierce™ c-Myc-标签 IP/Co-IP 试剂盒/ Pierce c-Myc-Tag IP/Co-IP Kit | 25 reactions |
| 24110 | Guanidine-HCl | 500 GM |
| 24115 | 8M Guanidine-HCl Solution | 200 mL |
| 24500 | NHS | 25 GM |
| 24510 | Sulfo-NHS | 500 MG |
| 24520 | Sulfo-NHS, No-Weigh Format | 8 X 2 MG |
| 24525 | Sulfo-NHS | 5 G |
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文献和实验或者互作蛋白复合物(红色+黄色)洗脱 Step 5:分析检测—Western Blot 或者质谱 常用“黑话” 以上示例图证明了 EDR1 和 EDR4 有相互作用。如果想要设计好实验,先清楚以下常用“黑话”含义。 阳性对照:证实细胞裂解物中确实存在靶蛋白(IP)或者互作蛋白对(co-IP,比如诱饵蛋白X和靶蛋白 Y),即为常说的 input。可直接取抽好的蛋白溶液进行 Western。 阴性对照:用来排除假阳性。IP/co-IP 后靶蛋白或者互作蛋白对都检测到了,固然是值得高兴
—— co-IP 检测 Hsp90 与 Cdc37 结合情况1、实验材料SKBR3 细胞,PMSF(Amresco,cat:329-98-6),cocktail(上海晶莱生物),脱脂奶粉(cat:66196131T),β-actin(上海晶莱生物)。Anti-Hsp90(santa,cat:sc-69703)、Anti-Cdc37(santa,cat:sc-13129)、Protein A+G agrose(Beyotime),细胞刮,4 度离心机(eppendorf,centrifuge
常见表位标签和序列常用表位标签的生物化学特性总结如下:氯霉素乙酰转移酶(CAT)这个 24kDa 大小的标签也用作报道基因,与大多数蛋白质融合时依然能保留其活性。这意味着它可以用来直接测量表达水平,而不需要 PAGE 或免疫检测。二氢叶酸还原酶(DHFR)这个 25kDa 蛋白质参与胸苷生物合成途径。带有这个标签的蛋白质的纯化可以通过甲氨蝶呤连接的树脂实现。FLAG带电的八肽序列(DYKDDDDK),可用于蛋白检测,特别是在串联为 3xFLAG™表位(DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDK
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