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杰美基因
- 库存:
大量
- 规格:
10/20次
供应试剂主要类别:细胞技术、分子技术、蛋白化学、免疫抗体、医学技术、生物化学、模式生物、微生物、植物、载体、毒理、营养、平台等等相关技术的各种大量试剂。
其中分子技术相关试剂类别如下:
DNA萃取试剂专题
胶回收或PCR产物纯化试剂专题
基因组DNA纯化试剂专题
法医学基因组DNA萃取试剂专题
DNA连接试剂专题
PCR反应试剂专题
RNA纯化试剂专题
RT-PCR试剂专题
RNA分析试剂专题
微型RNA(miRNA)试剂专题
核酸电泳试剂专题
报告基因检测试剂专题
甲基化分析试剂专题
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文献和实验真香!用 qPCR 做外泌体研究,南京医科大学拿下 41 分 SCI
方法 1. 外泌体 RNA 如何提取? 外泌体 RNA 可以用专用的外泌体 RNA 提取试剂盒提取,也可以用 Trizol 法提取,建议 Trizol 与外泌体的体积比不小于 4:1(也可以用 Trizol 直接裂解外泌体沉淀)。 2. 外泌体 RNA 如何定量? 外泌体 RNA 含量很低,不建议使用微量紫外分光光度计定量,可以使用 Agilent 2100 生物分析仪等定量,也可以直接按最大体积进行逆转录实验。 3. 外泌体做 qPCR 检测应该选什么参照? 外泌体没有通用的内参选择,可以使用外参(cel
),样本上样量不超过提取试剂盒说明书规定的上限,一般提取的 RNA 质量都是很好的。 ③除此之外,提取的过程中戴一次性干净手套;在单独洁净的区域操作;戴口罩并在操作过程中避免讲话。可有效防止实验者汗液、唾液中的 RNase 污染。 (2)该基因第一次扩增,其 CT 值偏大,而其余基因的 CT 值正常。 这种情况下就需要判定是因为基因的扩增效率低导致的 CT 值偏大,还是基因本身的表达量低造成的 CT 值偏大。 如何判定是因为基因的扩增效率低导致的 CT 值偏大,还是基因本身的表达量低造成的 CT
-A尾巴的RNA分子加上一串A尾巴,然后用带有一段通用序列(universal tag)的Oligo-dT及RT酶来合成cDNA。这样设计的一个好处就是一次RT反应合成了所有miRNA分子以及其他小RNA、mRNA对应的cDNA,接下来想用来检测什么都可以,细细算来省了不少特异引物和多次RT反应的钱呢!整个RT反应操作也是非常简单,加入预先混好的酶,37℃孵育60min,95℃孵育5min即完成cDNA合成。 最后一步就是取出一点cDNA为扩增模板,加入正反引物和real-time PCR 试剂
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