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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
杰美基因
- 库存：
大量
- 规格：
10次
供应试剂主要类别：细胞技术、分子技术、蛋白化学、免疫抗体、医学技术、生物化学、模式生物、微生物、植物、载体、毒理、营养、平台等等相关技术的各种大量试剂。
其中免疫抗体技术相关试剂类别如下：
免疫抗体二抗试剂专题
免疫抗体标记/内参－抗试剂专题
免疫抗体－抗试剂专题
免疫化学检测试剂专题
半胱氨酸蛋白酶原位荧光染色试剂专题
组织蛋白酶（CATHEPSIN）活性原位荧光染色试剂专题
免疫化学固着液试剂专题
免疫化学封阻液试剂专题
免疫化学抗原修复处理试剂专题
免疫化学抗体修饰处理试剂专题
免疫化学信号检测试剂专题
免疫化学复染试剂专题
免疫化学缓冲溶液试剂专题
电子显微镜制片处理试剂专题
ELISA制备试剂专题
荧光或共聚焦显微镜制片处理试剂专题
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文献和实验Elabscience|巨噬细胞极化总失败？RAW264.7/THP-1/BMDM/hMDM四大模型避坑指南与实操全攻略
264.7细胞极化培养及流式检测流程 通用准备：RAW264.7细胞复苏、传代扩增至对数生长期，消化收集后调整细胞密度至2.5×10⁵个/mL，铺板于合适培养板，使用完全培养基（含10%FBS的高糖DMEM）进行培养，于37°C、5% CO2培养箱中贴壁过夜。 M1极化：弃去旧培养基，更换为含LPS（300 ng/mL）和IFN-γ（200 ng/mL）的全培养基，或者直接使用M1型Raw264.7巨噬细胞极化培养和检测试剂盒（XJM004）继续培养24-48 h。诱导结束后收集细胞或上清，用于后续
光基团，可以直接为免疫荧光的样本提供绚丽的色彩。但是更多的情况下，一抗不带有荧光标记，需要偶联荧光基团的二抗与一抗结合，放大样本信号，并且添加耀眼的「彩妆」效果。选择二抗时除了要与一抗匹配之外，还要考虑荧光基团的颜色、稳定性等因素对成像效果的影响。1）荧光基团的颜色：每一个荧光基团都有它特定的激发光谱和发射光谱，选择荧光基团的时候，既要考虑实验的需求，也要考虑显微镜的光源和滤光片配置。常见荧光基团的激发光和发射光如下（表 1）所示：2）荧光基团的稳定性：荧光基团长时间暴露在光下（尤其是显微镜的汞灯、激光器等强
离心3min，弃上清； 2. 分别加入荧光素标记的抗CD的mAb 20ml，混匀； 3. 4℃孵育60min， 加入细胞洗液 ， 1500r/min离心3min，反复洗涤3次； 4. 用细胞洗液恢复体积至0.5ml，加入固定液20ml，混匀； 5. 上机检测。 注意事项 由于FITC（或PE）标记的抗CD的mAb可以从试剂公司方便购得，且方法稳定可靠，故在此介绍的是直接免疫荧光法的操作步骤。当然，也可采用间接直接免疫荧光法，操作方法同前。
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