SDS 十二烷基磺酸(硫酸)钠

十二烷基硫酸钠―聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS―PAGE)

十二烷基硫酸钠―聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS ― PAGE) 第二相聚丙烯胺 胺凝胶的选择主要取决于需要分离蛋白质的相对分子质量的范围，这与单相的聚丙烯酰胺凝胶电泳的选择是相同的。当蛋白质相对分子质量在15 000～200 000时，电泳迁移率与相对分子质量的对数呈线性关系。SDS―PAGE不仅可分离蛋白质，且可在一定范围内粗略测定蛋白质的相对分子质量。其主要步骤如下。 (1)凝胶配制及灌胶：胶浓度越高，所分离蛋白质的相对分子质量范围也越大。薄的胶，其染色和脱色快，且背景

辛酸-硫酸铵法从人血清中纯化IgG

一、实验目的1、初步掌握从血清中提取纯化IgG的方法步骤。2、了解辛酸-硫酸铵法纯化IgG 的原理。二、实验原理辛酸-硫酸铵法分两步进行。第一步用辛酸沉淀杂蛋白，辛酸为短链脂肪酸，在酸性条件下可沉淀血清或腹水中的白蛋白或其他非Ig蛋白质；第二步利用硫酸铵盐析将Ig沉淀下来，操作步骤如图3-10所示。经SDS-PAGE电泳检测能得到电泳纯度较高的Ig。三、仪器、原料和试剂1、仪器磁力搅拌器、离心机、低温冰柜。2、原料抗血清（兔抗鸡血清）。3、试剂(1) 乙酸-乙酸钠缓冲液：60mmol/L，pH

做 WB 要了解的有关 SDS-PAGE 的基本知识

的 SDS-PAGE 的相关知识。（PS：附带一张简单明了的 DNA 印迹、RNA 印迹及蛋白质印迹流程图～～）一、配胶、制胶首先 SDS（十二烷基硫酸钠，一种阴离子洗涤剂）能使蛋白变性，并使所有蛋白质颗粒表面覆盖一层 SDS→使蛋白均匀地带上负电荷→从而使质量相似但形状或电荷不同的蛋白在电泳液中能以相似的速度进行迁移→→因此 SDS 被加到凝胶溶液、蛋白样品和电泳液中，以确保蛋白在整个过程都展开并保持负电荷。其实所谓的凝胶，其本质是聚丙烯酰胺。过程中，多格聚丙烯酰胺分子相互交联，最后形成一个蛋白