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文献和实验蛋白质印迹免疫分析(Western Blot Anglysis)
,3.3-二氨基联苯胺)配制:5mg DAB溶于10ml 柠檬酸buffer(0.01mol/L 柠檬酸2.6ml,0.02 mol/L Na2HPO4 17.39ml),加30% H2O2 10 μl(临用时现配)。 9.脱色液:甲醇250ml,冰醋酸100ml,加蒸馏水至1000ml。 10.氨基黑染色液(0.1%氨基黑-10B):0.2g 氨基黑-10B 溶于200ml 脱色液中,充分搅拌溶解,滤纸过滤。 【操作步骤】
Western杂交时,为确认蛋白是否转至PVDF膜上,可用下列方法对膜上蛋白进行可逆性染色。 1. 氨基黑染色 染液:0.5% Amido Black (w/v), 25% isopropanol (v/v) and 10% acetic acid. 染色:将PVDF膜置于染液中染色数钟,ddH2O 脱色。 2. 考马氏亮蓝染色 染液:0.1% Coomassie Brilliant Blue R-250 (w/v) and 50% methanol (v/v
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