流式液相多重蛋白定量技术CBA

Cytometric Bead Array（CBA），即微量样本多指标流式蛋白定量技术，是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法，它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。日常实验中，常需对溶液体系中的可溶性蛋白进行定量检测，如细胞培养上清或血清中的细胞因子含量的定量分析，由于这些因子的含量较少，低于一般常规方法的检测下限，使用常用的蛋白检测方法western Blot等很难检测。 利用流式细胞仪可对荧光信号进行级数放大的特性，只需使受检的可溶性因子附着于一些具有近似细胞直径的微粒上，即可对受检样品中的各种可溶性因子进行检测。

CBA系统的工作原理简单，对应受检系统中的每一个检测指标都设有不同的捕获微球，不同的捕获微球上包被有特异的捕获抗体，并具有不同的荧光强度，通过捕获微球与待测样品溶液混合后，微球上的特异性抗体就与样品（血清、血浆或细胞培养液）中的相应抗原或蛋白结合，最后，加入荧光的检测抗体以形成“三明治”夹心复合物，通过流式细胞样进行荧光检测，便可对样品中的各检测因子的含量进行分析。由于CBA系统中每一个微球都能够提供一个和特定蛋白结合的表面，因此，每个微球就相当于一个单独的、包被好的ELISA板；相对于传统的ELISA技术，荧光信号显色的灵敏度比一般化学发光的灵敏度高，加上利用流式细胞仪对于荧光信号的高敏感性及放大作用，使用这种技术检测未知样品中的指标所需要的样品浓度更低，实验时间更短；另外，常规的ELISA操作，每次只能对一个样本中的一个指标进行检测，各检测指标间的操作需分开进行，往往造成珍贵样本的耗费，如病患者血液中向免疫调节细胞因子包括IFN-γ、TNF-α、IL-2等，通过CBA系统，可同时对一个对样品中的多个指标进行检测，这为一些ELISA技术无法满足的实验提供了新的检测手段。