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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
三年
- 英文名:
Antibiotic Agar No.4
- 库存:
1000
- 供应商:
广东环凯微生物科技有限公司
- 规格:
100g
022176 抗生素检定培养基4号
(Antibiotic Agar No.4)
用 途:
用于两性霉素B的效价及残留的微生物学检定(中华人民共和国药典2010版)。
原 理:
本法是利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用,抑菌圈直径与抗生素的浓度或活性有关;比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小,以测定供试品效价的一种微生物学方法。
配方(每升):
胨 10g
氯化钠10g
枸橼酸钠10g
葡萄糖 10g
琼脂14g
最终pH 6.1±0.1
使用方法(计数用法):
1、 称取本品54g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,115℃高压灭菌30min。
2、 双碟的制备应在无菌室或洁净室内进行,并注意避免微生物及抗生素污染。培养基应在水浴中或微波炉内融化,避免直火加热。
3、 双碟的底层:取出试验用菌悬液,按预试好的加菌量[能得清晰的抑菌圈位度。二剂量法标准品溶液的高浓度所致的抑菌圈直径在18~22mm,三剂量法标准品溶液的中心浓度所致的抑菌圈直径在15~18mm],用灭菌吸管吸取菌悬液适量,加入已融化并保温在水浴中(水浴温度:48~50℃)的培养基内,摇匀,用灭菌大口15mL或20mL吸管或其它灭菌分装器,吸取15mL注入双碟内,使其均匀摊布,等凝固后放置钢管。
4、 放置钢管:使用钢管放置器或小眼科镊子,使钢管平稳的落在培养基上,相应剂量的钢管 对角均匀放置。钢管放妥后,双碟静置5~10分钟后,再开始滴加抗生素溶液。
5、 滴加抗生素溶液用灭菌毛细滴管或微量加样器(调节加样量约为200-300μL),在滴加之前用溶液洗2~3次。滴加标准品及供试品溶液顺序,因实验设计方法不同而异。(2.2)法,在双碟的4个钢管中分别成“Z”字形滴加标准品及供试品高、低两种浓度的溶液;在(3.3)法的6个钢管中间隔3个钢管中分别滴加标准品及供试品高、中、低3种浓度,并使相同浓度成对角。滴加溶液至钢管口平满。注意滴加时间溶液的间隔不可过长。
6、 滴加完毕,用陶瓦盖覆盖双碟,平稳置于双碟托盘内,双碟叠放不可超过3层,将双碟托盘水平平稳地移入培养箱中间位置,在35~37℃或该药品标准规定的温度下培养至所需时间。
7、 抑菌圈测量:测量前应检查抑菌圈是否圆整,如有破圈或圈不圆整,应舍弃该碟。可用抑菌圈测量仪或游标卡尺测量。
质量控制:
本品在灭菌后应澄清无沉淀,下列菌株接种后35~37℃培养24~36h生长情况如下表:
| 菌 名 | 菌 号 | 抗生素 | 检测效果 |
| 啤酒酵母 | ATCC9763 | 两性霉素B | 抗生素浓度的对数值与抑菌圈直径线性相关。 |
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:100g
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phoolishkate:脂质体转染后必须用不含抗生素的培养基吗?我的培养基都加了青链霉素,转染后是不是不能用?丁香园网友applezph认为:由于脂质体转染对细胞存在一定毒性,一般说来转染前的一次传代就应用不含抗生素的培养基,转染后的话我觉得也不应该加青链(我都是这么做的)当然如果对自己的操作实在没有把握的话,我认为你可以考虑试试转染后加,但不要太早,4-6小时换液用无抗生素的,可以24后再换用含抗生素培养基丁香园网友qxlbljys认为:1.做细胞转染时,由于转染介质如脂质体可增加膜的通透
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