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- 2025年07月15日
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Real Time PCR Detection Kit for the Analysis of EGFR Gene Mutations
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广州达健生物科技有限公司
肺癌是严重危害人类生命健康的最常见的恶性肿瘤之一，WHO将肺癌分为鳞癌、腺癌、大细胞癌和小细胞未分化癌四类，其中前三类在生物学特征、临床表现、治疗方法与预后等方面有许多共同的特点，统称为非小细胞肺癌，约占肺癌总数的80％～85％，与小细胞癌相比其癌细胞生长分裂较慢，扩散转移相对较晚。近年来出现的新的治疗方法——靶向治疗，使个体化治疗成为可能，明显提高了肿瘤治疗的疗效。在肺癌靶向治疗中，两种小分子酪氨酸激酶抑制剂（即Iressa和Tarceva）能特异性地抑制具有EGFR基因突变的非小细胞肺癌癌细胞的生长，使病人的预后得到改善。因而肺癌细胞中EGFR基因的突变状态是决定小分子酪氨酸激酶抑制剂是否有效的关键性指标，EGFR基因为该靶向治疗的分子靶点。
EGFR基因位于7号染色体短臂7p12-14区，共118kb，由28个外显子组成。其酪氨酸激酶功能区由外显子18-24编码，其中外显子18-20编码N-Lobe，外显子21-24编码C-Lobe。迄今为止发现的EGFR基因突变90％以上位于外显子19-21。2004年，Lynch和Paez分别报道了对Iressa有效、无效和未经Iressa治疗的3组病人进行EGFR基因外显子序列的检测结果，发现EGFR基因的变异与NSCLC患者对Iressa的有效率有明显相关性。突变基因主要存在于腺癌，几乎均为杂合型变异，都定位于EGFR酪氨酸激酶的ATP结合位点的编码区(第l8～21位外显子)，表现为一个或一段碱基的缺失、插入，碱基替换引起的错义突变等，这些突变可引起EGFR酪氨酸激酶的活性增强。
最新研究发现在肺癌靶向治疗药物Iressa治疗有效的患者中，51.5％的患者有EGFR基因外显子19的缺失，27.8％的患者有EGFR基因外显子21的点突变。通过对394例中国人肺癌（台湾101例，大陆293例）的综合分析，我国肺癌病人中EGFR基因外显子19和外显子21异常的发生率分别为18.5％和13.7％，分别占所有EGFR基因突变病例的54.5％和40.3％，其中外显子19以del E746-A750和del L747-P753insS为最常见的缺失形式，外显子21以L858R和L861Q为最常见的点突变形式。上述资料揭示，EGFR外显子19缺失和外显子21点突变不仅发生率高，而且其异常与药物疗效的相关性好，因而EGFR外显子19缺失和外显子21点突变是肺癌靶向治疗的研究重点之一。
二、产品用途
该产品用于定性检测经临床确诊为非小细胞肺癌患者的肺组织新鲜样本或石蜡包埋样本中的EGFR基因外显子E18M、E19M、E20M1、E20M2、E21M1、E21M2位点中42个基因突变亚型，为临床医生对非小细胞肺癌患者选择肿瘤靶向药物治疗提供参考。
三、检测原理及产品特性
本试剂盒中的特异性引物与探针同DNA模板结合后，Taq DNA聚合酶以脱氧核苷酸（dNTP）为底物，对内参基因及EGFR基因18、19、20、21外显子特定区域突变型基因进行体外扩增。本试剂盒采用荧光PCR技术，通过特异性探针水解释放荧光，监测PCR反应的进行，确定EGFR基因突变情况。该试剂盒可有效检测出微量（1%－5%）的突变型基因，具有高度的灵敏性和特异性。本试剂盒适用的仪器包括ABI定量PCR仪系列、LightCycler 480、Mx3000P、Mx3005P等。推荐使用的仪器为ABI定量PCR仪系列，如ABI PRISM 7500。
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参考文献
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特异性探针，无需测序，也不受突变碱基位点与类型的局限，在Roche LlightCyclerTM 480 荧光定量PCR 仪器上直接获得高分辨率熔解曲线分析，即可完成对样品基因型的判断。 成本低：相比传统的SNP/突变分析法和定量探针法，简化了操作时间和步骤，大大降低了使用成本，并且拓展了其应用面。 适用范围广：可用于新鲜或酒精固定、石蜡包埋的手术标本，也可用于微量的穿刺或活检标本、血液标本、粪便标本等非手术标本的检测。传统“PCR+测序”方法难以检测大部分不能手术的患者。 其它：只检测PCR
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