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文献和实验可变区。 小鼠和人在胚系中Ig基因的结构见图3-4和图3-5。 2.重链可变区基因的移位 在重链基因重排开始时,二条染色体上都发生D基因片段移位到J基因片段而发生D-J基因连接。在此以后,只有其中一条染色体上的V基因片段与D-J基因片段连接。V H 基因片段5'端含有启动子(promoter),J H 和C μ 基因片段之间的内含子中含有转录增强子(transcriptinal enhancer
辨越好,不同的凝胶具有不同的推荐上样体积,如下表:凝胶类型 推荐上样体积(%Vt)Sephadex 2-5%Sepharose 2-5%Sephacryl HR 1-2%Superdex PG 1-2%Superose PG 1-2%Superdex 0.5%Superose 0.5%对于利用Sephadex G25进行蛋白质脱盐的特殊情形,样品量达到柱体积的25%仍可以保证蛋白与盐分开。d、洗脱流速:一般较低的流速下(5~10cm/h)分辨率较高,但Superdex PG,Sepharose FF
(monension)和Brefeldin A。在PMA/ionomycin活化T淋巴细胞时,外周血T淋巴细胞内IL-4、IL-5的检测在刺激后4~6 h可获得较强的信号,而细胞内IL-2和IFN-γ多在刺激后8~10 h。为了同时获得Th1/Th2胞内细胞因子信号,目前文献的报道多采用体外刺激4~6 h。 (二)细胞固定 细胞在体外刺激后需要对细胞进行固定。固定的目的在于通过蛋白的交联和变性一方面使细胞因子固定在细胞内,另一方面避免细胞表面抗原丢失。常用的固定剂为副福尔马林(paraformadehyde
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