纤维素酶，热稳定，重组溶液

重组胰蛋白酶最适温度和温度稳定性

4、底物溶液（2.5 mmol/L）：精密称取 N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯（BAEE）（Sigma）42.8 mg，加入相应 50 ml 体积的测活缓冲液，使其溶解，即为 2.5 mmol/L 的底物母液，现配现用, 使用时，用测活缓冲液 10 倍稀释。 5、供试品：精密称取待测样品适量。平行分装 3 支，置于蓝冰保温运输箱内，室温下放置。 实验方法： 1、重组胰蛋白酶运输条件下的稳定性：样品测定活性，作为初始活性。蓝冰于-20℃ 充分预冷后，取出，与样品同时放入泡沫保温运输

纤维素酶的分离纯化方法

问：本人要做纤维素酶的分离纯化，请高手传授方法。答：纤维素酶并不是单一的蛋白酶，而是一个酶系，其中包括至少3种组分。如果你用重组菌表达其中的一个片段或者产酶基因，那么要看你的载体是什么？如果有亲和标签可以用亲和层析，如果没有，那就只能考虑疏水或离子交换等方法了。不过工业上制备纤维素酶一般是不用纯化的，中试以上规模的酶制剂生产大多采用真菌发酵，纤维素酶会直接分泌到培养基中，然后通过结晶就可以得到粗酶颗粒，一般不需要色谱纯化。答：3种组分可能都是说得轻的，这每种组分可能都是多种酶组成的酶系

反转录过程中需要考虑哪些因素？

录酶是实验室中首批用于 cDNA 合成的酶之一。该酶是一种分子量为 170-kDa 的异二聚体，最佳反应温度范围为42-48℃。AMV 反转录酶具有较强的 RNase H 活性，可降解 RNA:cDNA 复合物中的 RNA，获得的 cDNA 片段较短（ MMLV 反转录酶因具有单体结构而成为常用的替代品，可对重组酶进行更简单的克隆和修饰。MMLV 反转录酶是一种分子量为75 kDa 的酶，反应温度约为37°C。虽然 MMLV 的热稳定性低于 AMV 反转录酶，但其 RNase H 活性较低，因此具有