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北诺
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北诺
BL21 Plyss(DE3)
BL21Condon Plus (DE3)
TB1(DE3)
C41(DE3)
C43(DE4)
Rosetta(DE3)
Origami B (DE3)
Rosetta-gami-B(DE3)
Rosetta-gami(DE3)Plyss
DH5α
Top10
Top10F'
JM109(DE3)
TG1
Xl1-Blue
X10-Gold
HB101
DH10Bac
STBL3菌
BJ5183细菌
PGEX4T-1
PGEX4T-2
PGEX4T-3
PGEX-6P-1
PGEX-KG(不完整)
PET3b
PET5b
PET11a
PET15b
PET20b
PET21b
PET22b
PET24a
PET25b
PET26b
PET27b
PET28a
PET28b
PET30a
PET31a
PET32a
PET35
PET41a
PET43.1
PET50b
PET52b
PET302
PET303
PET-Dsba
PET-GST
PET-His
PET-Trx
PDsred2-ER
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大肠菌株DH5α
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大肠菌株BL21(DE3)
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文献和实验问: A549细胞到底是如何形态?我见过三角形,近乎MDCK细胞形态的,还有的呈长梭形。我感觉自己的细胞好像混进了MDCK细胞。大家帮忙诊断一下,谢谢。 我培养的A549细胞 答1:
我也在养A549细胞,也来讲讲自己的经验,希望大家共同学习。我们主要是看细胞的密度,大概有80-90%铺满培养瓶底就可以传代了,时间长短不一,大概有5-7天吧,一瓶一般传3-4瓶,中间一般会有一次换液的。培养基用的是1640+10%的小牛血清+200u/ml庆大霉素。传代时先倒掉就培养基,然后用PBS洗一两次,然后再用0.25%胰酶消化(100ml培养瓶盖住表面大概要两滴管左右),可镜经下观察细胞间已出现细胞胞质回缩变圆,缝隙变大(我的细胞大概要2min左右),即可倒去消化液,加入培养基,吹打
我养了三种贴壁的细胞,用同样的消化方法,都很好。这三种细胞是A549,ECV304,2BS。1、0.25%胰酶新鲜解冻,不需要预热。2、倒掉培养瓶中的培养基,并用预冷的D-Hank‘s洗两次(要冷,用前4度中取出)。3、加入约1-2ml的胰酶,晃动瓶子,使液体浸润瓶底。4、超净台上放置约1-2分钟(2BS需要的时间更短,约1分钟)5、镜下观察(我一般都省略了,因为每次的效果都很好),见细胞变圆或细胞间隙变大,即可加入含血清的培养基终止消化。(我们的胰酶都不去掉)6、从瓶口到瓶底吹打,可见细胞
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