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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RT
- 保质期:
10年
- 英文名:
北诺
- 库存:
1000
- 供应商:
北诺
- 规格:
250个/包
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文献和实验。 3. Silica 膜选择性结合DNA 在DNA-prep Tube 中整合有silica 膜,对DNA 有高盐结合低盐洗脱的特性。含DNA 的下相在加入结合溶液(Buffer B)调整溶液的离子条件和pH 条件后,DNA 可被选择性结合到silica 膜上,经洗涤进一步去除杂质后,DNA 可被微量去离子水或Eluent 洗脱下来。 4. 保持RNA 分子完整性 RNA 分子对RNA 酶和理化因素非常敏感。Buffer R-A 在裂解细胞和细胞核的同时迅速灭活RNA 酶,其他溶液均能强烈抑制RNA 酶活
设备 1. 30m1Corex管,酸洗并硅化 2. 预冷离心机和吊桶式转头 实验步骤 1.收集新鲜人血液并立即用Ficoll分离白细胞。 2.用冰冷PBS洗涤外周血淋巴细胞3次。 3.在50ml塑料离心管中收集外周血淋巴细胞,并加入7ml裂解缓冲液(可溶解达到5×108 个外周血淋巴细胞),然后剧烈涡旋振荡以溶解细胞。 4.加入7体积(49m1)4mol/L氯化锂,4℃孵育15~20小时
。3、某些情况下(例如从感染了DNA病毒或用DNA转染的细胞中制备RNA时),必须从细胞总RNA中去除寡脱氧核核苷酸。否则,当用这种RNA构建cDNA库或进行引物延伸反应时应会出问题,反转录过程中法染的模板DNA片段可能会与RNA杂交而充当引物,从而导致物定mRNA5'末端定位的错误或产生截短的cDNA克隆。a)步骤12后,加200μl 3mol/L乙酸钠(pH5.2),用自动微量移液器反复吹吸,以重悬核酸沉淀,将悬浮液移至另一个灭菌的微量离心管内。b)用微量离心机于室温以12,000g离心10分钟,RNA
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