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- Thermo Scientific
- USA
- ER0971
- 2025年07月14日
企业认证
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- 文献和实验
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-20
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2年
- 英文名：
thermo
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1000
- 供应商：
北诺生命科学
公司产品线包括：FastDigest & 常规限制性内切酶、修饰酶、PCR & RT-PCR产品、核酸和蛋白质Markers、分子生物学试剂盒（分子克隆、核酸纯化、标记、检测）、转染试剂、核苷酸等。
Unstained Protein MW Marker, 2 x 1 mL. 26610(SM0431) Pierce
Prestained Protein MW Marker, 500 uL. 26612(SM0441) Pierce
PageRuler Unstained Protein Ladder, 2 x 250 uL. 26614(SM0661) Pierce
PageRuler Prestained Protein Ladder, 2 x 250 uL. 26616(SM0671) Pierce
PageRuler Prestained Protein Ladder, 10 x 250 uL. 26617(SM0672) Pierce
PageRuler Plus Prestained Protein Ladder, 2 x 250 uL. 26619(SM1811) Pierce
PageRuler Plus Prestained Protein Ladder, 10 x 250 uL. 26620(SM1812) Pierce
Spectra Multicolor Broad Range Protein Ladder, 10 x 250 uL. 26623(SM1842) Pierce
Spectra Multicolor High Range Protein Ladder, 2 x 250 uL. 26625(SM1851) Pierce
Spectra Multicolor Low Range Protein Ladder, 250 uL. 26628(SM1861) Pierce
PageRuler Broad Range Unstained Protein Ladder, 26630(SM1881) Pierce
PageRuler Low Range Unstained Protein Ladder, 2 x 250 uL. 26632(SM1891) Pierce
Spectra Multicolor Broad Range Protein Ladder, 2 x 250 uL. 26634(SM1841) Pierce
10X Buffer Cfr9I B02 Fermentas
10X Buffer Cfr10I B04 Fermentas
10X Buffer EcoRI B12 Fermentas
10X Buffer Bsp143I B13 Fermentas
Bovine Serum Albumin B14 Fermentas
10X Taq Buffer with KCl and 15 mM MgCl2 B16 Fermentas
Dilution Buffer for Restriction Enzymes B19 Fermentas
10X Buffer Eco52I B22 Fermentas
10X Buffer SduI, Ppu21I B23 Fermentas
10X Buffer SdaI B24 Fermentas
10X Buffer Eam1105I B25 Fermentas
10X Buffer Ecl136II, PacI, SacI B26 Fermentas
10X Buffer AarI, AjiI, Bpu10I, ScaI, PasI B27 Fermentas
10X Buffer TaqI B28 Fermentas
10X Buffer KpnI B29 Fermentas
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文献和实验通过加入基因组 DNA 模板以及设计好的引物进行目的基因的扩增，得到 PCR 产物后进行琼脂糖凝胶电泳验证条带大小，然后通过胶回收，获得纯化目的片段产物。由于加入保护碱基，回收产物需要进行限制性内切酶切从而暴露黏性末端。2. 线性化质粒：将原始的质粒载体，比如 pcDNA3.1 质粒，选择合适的酶切位点，比如 NheI/KpnI 进行酶切，获得线性化的质粒。酶切体系一般选择 50ul，试剂加好之后 37°C 孵育 6~8 小时，或适当延长时间，保证质粒酶切完全。每隔一段时间振荡一下并离心以防液滴蒸发
通过加入基因组 DNA 模板以及设计好的引物进行目的基因的扩增，得到 PCR 产物后进行琼脂糖凝胶电泳验证条带大小，然后通过胶回收，获得纯化目的片段产物。由于加入保护碱基，回收产物需要进行限制性内切酶切从而暴露黏性末端。2. 线性化质粒：将原始的质粒载体，比如 pcDNA3.1 质粒，选择合适的酶切位点，比如 NheI/KpnI 进行酶切，获得线性化的质粒。酶切体系一般选择 50ul，试剂加好之后 37°C 孵育 6~8 小时，或适当延长时间，保证质粒酶切完全。每隔一段时间振荡一下并离心以防液滴蒸发
will99_04 小弟想用pGL3-vector basic作为载体装载一个启动子片段，该启动子片段需要经PCR克隆，故要设计引物，在引物的5‘端加入内切酶位点。经过查询后发现可以用一下三种内切酶：KpnI，NheI，MluI 查TAKARA的产品目录后发现，这三种酶的反应温度均为37°，但所用缓冲液不同。 提问：有没有适合两种酶（从上述三种同时反应的universal buffer（通用缓冲液）？ devil19840
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