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TRAP/ALP染色试剂盒
破骨/成骨双重染色

正常的骨代谢是通过成骨细胞生长与破骨细胞建立骨吸收而维持平衡。成骨细胞的标记酶是碱性磷酸酶(ALP)。破骨细胞的标记酶是抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)。这两种标记酶在组织切片或者培养细胞过程中,被作为成骨细胞、破骨细胞存在的标记指标。
本试剂盒可通过骨组织切片以及培养细胞中TRAP/ALP酶活性进行组织染色。通过观察成骨细胞和破骨细胞的染色成像,可检查细胞的分化状态和骨组织的分布情况。
◆特点
● 使用时混合3种溶液,可制备TRAP酶活性染色的显色底物溶液。
● ALP酶活性染色使用的是预混物溶液,操作简便。
● TRAP的活性部位呈红紫色,ALP的活性部位呈蓝色(茶褐色),可双重染色。
● 适用于骨组织切片(脱钙GMA树脂包埋切片)以及培养细胞。
◆试剂盒组成
| ● 酒石酸溶液(×10)·······3 mL ● 酸性磷酸酶底物液A······30 mL ● 酸性磷酸酶底物液B······3 mL ● 核染色试剂··············10 mL ● 碱性磷酸酶预混物溶液····30 mL
<备注> 本产品可对应培养细胞包装24孔板-5次,96孔板-6次。 备注> 骨组织载玻片(一个载玻片约使用500 μL)包装为60个。
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◆培养细胞TRAP/ALP酶活性染色案例
![]() |
● 用TRAP染色剂使破骨细胞呈红色 ● 用ALP染色剂使成骨细胞的细胞膜、软骨细胞和细胞间膜呈茶褐色 ● 用核染色试剂使各种细胞核呈蓝绿色。 |
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RAW264细胞的TRAP活性染色 |
MC 3T3-E1细胞ALP活性染色 |
◆相关产品
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
| 294-67001 | TRAP/ALP Stain Kit TRAP/ALP双重染色试剂盒 |
60 tests | 病理研究用 |
◆相关产品
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| PMC-AK20-COS | Alkaline Phosphatase Staining Kit 碱性磷酸酶染色试剂盒 |
1 kit |
| PMC-AK04F-COS | TRAP Staining Kit 抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒(TRAP) |
10 plate |
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文献和实验1. 前言了解活体的骨代谢状态是研究相关细胞生理活性的一个有效方法。对骨组织进行碱性磷酸酶(ALP)染色后可以了解成骨细胞的骨形成情况,对骨组织进行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色可以了解破骨细胞的骨吸收情况。若在同一切片上进行双重染色就能同时了解两者的情况。另外,它有一个优点是在脱钙标本里,只要可以双重染色,无需专用的设备,仅用一般的设备就可以方便地观察到骨代谢。在此前提下,我们需要研究探讨双重染色的可行性。2. 标准标本的制作用树脂包埋法或冻结切片法制成的标本作为标准标本,与脱钙
常用于软骨组织或早幼粒细胞、巨核细胞染色 甲苯胺蓝染色 染色 观察软骨组织形态或组织内肥大细胞的数量及分布 Trap染色 染色 用于检测骨、骨细胞中破骨细胞的染色,使破骨细胞呈红色,细胞核浅蓝色,用以显示破骨细胞的分布及数量变化。 ALP染色 染色 用于检测骨细胞、骨组织、肾、肝碱性磷酸酶的染色方法,使碱性磷酸酶呈黑色,细胞核呈浅蓝色,这是成熟成骨细胞的标志性酶;也可用于肝炎和肾炎的检测
一、成骨诱导体系:1. 试剂成骨诱导液:DMEM+10%FBS,双抗,谷氨酰胺,诱导因子:地塞米松:通过促进Cbfal mRNA和Osterix mRNA的表达而促进骨髓基质细胞向成骨细胞分化。β-甘油磷酸钠:可促进地塞米松对MSC的的诱导分化。Vc:一种重要的营养素和氧化还原剂,在骨盐代谢及骨形成中具有重要作用。在体外,它能增加钙盐的沉积,促进矿化结节的形成,并通过间充质细胞间接调节破骨细胞的分化。维生素C能直接抑制核因子κB受体活化子配体(RANKL)诱导的破骨细胞形成 。2. 诱导步骤
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