果糖发酵管

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  • 2025年07月12日
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      上海沪震

    基础果糖发酵管
    绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂(例如核苷酸)。MEM/F12 这两种培养基各取1/2,形成神经生物学最通用的培养基。Dulbecco`s改良培养基——DMEM,现应用于快速生长的细胞,同MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。选择某种培养基,应仔细了解成分表,应知道大多数情形下培养基都有不足。例如,有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸,而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域,但它对某些对谷氨酸敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言,则并非最佳选择,特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。F12中含有硫酸亚铁,据报道也有神经毒效应。
    果糖发酵管 制备方法:
    1. 培养同源细胞(未克隆前时的同一细胞)至半汇合状态时,更换一次培养液,再继续培养24~48小时后,吸出所有培养液。
    2. 离心:3000~4000/分离心10分钟,吸取上清液。
    3. 滤过:再经直径0.22μm滤孔的滤膜过滤,低温冻存贮备用;用时取1分适应培养基+2培养基混合使用。
    生长因子绝大多数哺乳类胚胎神经元有严格的营养要求,若不能提供适宜的生长因子或合适的因子组分,将会使绝大多数神经元在体外培养的数天中死亡。解决这一问题有两条思路,一是让培养细胞提供自己的营养因子,二是在果糖发酵管 中加入纯的生长因子。如果细胞混合物能在高密度时生长,所需的生长因子便会积累到可观的数值,尤其当培养基很少变化时。若某种细胞混合物生长时有很少的营养需求,可保持培养基在一段时间里不作任何变动,以使营养(生长)因子积累,而最后促使所需要的细胞类型能够生长。但是,这种对营养(生长)因子自身倚赖性亦有弊端,因为通常在混合细胞群体中细胞很难有同比例增殖,某些细胞会因生长条件的贫乏而受限制。另外,这种方法只能进行相当高密度的细胞培养。因为培养基的条件在细胞的较低密度时变的不够有效。不过某些时候纯化神经元群体的低密度培养可用条件培养基(经过了高密度培养)进行,或在胶质上生长的神经元所用过的培养基来支持。
    满足神经元营养需求的第二条途径是向培养基中加入生长因子。通常用于组培的通用适宜因子是神经生长因子NGF。不过,只有少数对这种蛋白质有反应的细胞类型的细胞才能生长。
    果糖发酵管 注意事项
    1 用L-多聚赖氨酸(0.1mg/ml) 包被培养板后,要待其干后才能接种,因为其对神经元有毒性。L-多聚赖氨酸(0.1mg/ml)能回收再利用。
    2 取脑组织时动作尽量要快,并且尽量低温操作。
    3 分离皮层和海马时,要尽量分离脑膜和血管,否则有大量的成纤维细胞。
    4 用吸管轻轻吹打细胞时,尽量不起泡沫,以免损伤神经元。
    5 接种细胞的过程,动作要快,以免细胞聚集。
    6 接种细胞后,24h勿移动,以免影响细胞贴壁。
    果糖发酵管 相关产品如下:
    hz1901 肉汤培养基A 250g 一种通用的营养培养基,用于多种微生物的增菌培养
    hz1902 琼脂培养基B 250g 一种通用的营养培养基,用于各种微生物的培养。
    hz1903 琼脂培养基C 250g 用于霉菌和酵母菌的分离培养
    hz1904 肉汤培养基D 250g 用于食品中沙门氏菌检验前增菌培养
    hz1905 增菌肉汤培养基E 250g 用于肠杆菌科细菌的增菌培养
    hz1906 琼脂培养基F 250g 用于肠道菌计数和肠杆菌科鉴别
    hz1907 肉汤培养基G 250g 用于大肠杆菌、大肠菌群的检测
    hz1908 琼脂培养基H 250g 用于肠道致病菌的选择性分离培养。
    hz1909 肉汤培养基I 250g 用于沙门氏菌选择性增菌培养。
    hz1910 琼脂培养基J 250g 用于沙门氏菌选择性分离培养
    hz1911 琼脂培养基K 250g 用于沙门氏菌选择性分离培养
    hz1912 琼脂培养基L 250g 用于沙门氏菌的选择性分离培养
    hz1913 琼脂培养基M 250g 于肠杆菌科细菌的生化反应筛选。
    hz1914 琼脂培养基N 250g 于绿脓假单胞菌的分离培养。
    hz1915 琼脂培养基O 250g 用于金黄色葡萄球菌的分离培养。
    hz1916 培养基P 250g 用于梭菌的增菌培养和计数。
    hz1917 培养基Q 250g 营养非常丰富,用于各种细菌的基础培养基。
    hz1918 培养基R 250g 用于大肠菌群选择性增菌
    hz1919 缓冲氯化钠蛋白胨溶液(PH7.0) 250g 用于药品中细菌的前增菌或样品制备。
    hz1920 琼脂培养基S 250g 用于饮用水中细菌总数的计数。
    hz1922 RV肉汤(EP) 250g 用于沙门氏菌选择性增菌培养。
    hz1923 甘露醇盐琼脂 250g 用于金黄色葡萄球菌选择性分离培养
    美国药典培养基(USP标准)
    hz1961 液体大豆酪蛋白消化物培养基 250g 用于医药工业洁净室(区)沉降菌的测试。
    SoybeanCasein Digest Medium
    hz1962 甘露醇盐琼脂培养基 250g 用于金黄色葡萄球菌选择性分离培养。
    MannitolSalt Agar Medium
    hz1963 酪蛋白胨大豆卵磷脂吐温20培养基 250g 用于化妆品细菌总数测定。
    Casein DigestSoy LecithinPolysorbate 20 Medium
    hz1864 大豆-干酪素消化物琼脂培养基 250g 用于医药行业的卫生监测培养。
    Tryposec Soya Agar Medium
    hz1965 改良大豆-干酪素消化物培养基 250g 用于医药行业的卫生监测培养。
    Tryposec Soya Modified 250g
    hz1966 Baird-Parker琼脂基础 250g 用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养。
    Baird-Parker Agar Base 250g
    hz1967 溴化十六烷基三甲胺琼脂培养基 250g 用于绿脓杆菌的选择性分离培养。

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