N6 培养基

基础N6 培养基
绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上，添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物，其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸，维生素的范围亦很广，另外常规含有无机盐和代谢添加剂（例如核苷酸）。MEM/F12 这两种培养基各取1/2，形成神经生物学最通用的培养基。Dulbecco`s改良培养基——DMEM，现应用于快速生长的细胞，同MEM含有相同的营养成分，但浓度高出2~4倍。选择某种培养基，应仔细了解成分表，应知道大多数情形下培养基都有不足。例如，有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸，而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域，但它对某些对谷氨酸敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言，则并非最佳选择，特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。F12中含有硫酸亚铁，据报道也有神经毒效应。
N6 培养基 制备方法：
1. 培养同源细胞（未克隆前时的同一细胞）至半汇合状态时，更换一次培养液，再继续培养24~48小时后，吸出所有培养液。
2. 离心：3000~4000/分离心10分钟，吸取上清液。
3. 滤过：再经直径0.22μm滤孔的滤膜过滤，低温冻存贮备用；用时取1分适应培养基+2培养基混合使用。
生长因子绝大多数哺乳类胚胎神经元有严格的营养要求，若不能提供适宜的生长因子或合适的因子组分，将会使绝大多数神经元在体外培养的数天中死亡。解决这一问题有两条思路，一是让培养细胞提供自己的营养因子，二是在N6 培养基 中加入纯的生长因子。如果细胞混合物能在高密度时生长，所需的生长因子便会积累到可观的数值，尤其当培养基很少变化时。若某种细胞混合物生长时有很少的营养需求，可保持培养基在一段时间里不作任何变动，以使营养（生长）因子积累，而最后促使所需要的细胞类型能够生长。但是，这种对营养（生长）因子自身倚赖性亦有弊端，因为通常在混合细胞群体中细胞很难有同比例增殖，某些细胞会因生长条件的贫乏而受限制。另外，这种方法只能进行相当高密度的细胞培养。因为培养基的条件在细胞的较低密度时变的不够有效。不过某些时候纯化神经元群体的低密度培养可用条件培养基（经过了高密度培养）进行，或在胶质上生长的神经元所用过的培养基来支持。
满足神经元营养需求的第二条途径是向培养基中加入生长因子。通常用于组培的通用适宜因子是神经生长因子NGF。不过，只有少数对这种蛋白质有反应的细胞类型的细胞才能生长。
N6 培养基 注意事项
1 用L-多聚赖氨酸（0.1mg/ml） 包被培养板后，要待其干后才能接种，因为其对神经元有毒性。L-多聚赖氨酸（0.1mg/ml）能回收再利用。
2 取脑组织时动作尽量要快，并且尽量低温操作。
3 分离皮层和海马时，要尽量分离脑膜和血管，否则有大量的成纤维细胞。
4 用吸管轻轻吹打细胞时，尽量不起泡沫，以免损伤神经元。
5 接种细胞的过程，动作要快，以免细胞聚集。
6 接种细胞后，24h勿移动，以免影响细胞贴壁。
N6 培养基 相关产品如下：
Brilliant Green Agar 250g
hz1973 XLD培养基 250g 选择性培养基，用于分离志贺氏菌属，也可用于分离沙门氏菌属
hzlose Lysine Desohzcholate Medium 250g
hz1975 亚硫酸铋琼脂（hz） 250g 用于沙门氏菌的选择性分离。
Bismuth Sulfite Agar 250g
hz1976 三糖铁琼脂培养基 250g 生化培养基，用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选。
Triple SugarIronAgar Medium 250g
hz1977 麦康凯琼脂培养基 250g 用于革兰氏阴性肠道杆菌的分离。
MacConkey Agar 250g
hz1978 伊红美蓝琼脂(EMB) 250g 弱选择性培养基，用于分离肠道致病菌，特别是大肠杆菌
Eosin-Methylene Blue Agar 250g
hz1979 沙氏葡萄糖琼脂培养基 250g 用于药品抑菌剂效力检测中细菌检测。
Sabouraud Dextrose Agar Medium 250g
hz1980 马铃薯葡萄糖琼脂（PDA） 250g 用于霉菌，酵母菌计数。
Potato Dextrose Agar 250g
hz1981 缓冲氯化钠蛋白胨培养液PH7.0 250g 用于药品中细菌的前增菌或样品制备。
Buffered Sodium Chloride – Peptone Solution PH7.0 250g
hz1982 大豆酪蛋白消化物琼脂培养基 250g 用于医药工业洁净室（区）沉降菌的测试
培养基原料及试剂 单位：元
hz7001 胰蛋白胨 250g AR
hz7002 胰酪胨 250g AR
hz7003 酵母抽提粉 250g AR
hz7004 细菌学琼脂 250g AR
hz7005 琼脂糖 250g AR
hz7006 蛋白胨 250g AR
hz7007 大豆蛋白胨 250g AR
hz7008 酸水解酪蛋白 250g AR
hz7009 多价蛋白胨 250g AR
hz7010 马玲薯浸粉 250g AR
hz7011 牛肉浸粉 250g AR
hz7012 麦芽浸粉 250g AR
hz7013 肝浸粉 100g AR
hz7014 牛心浸粉 100g AR
hz7015 牛胆盐 100g AR
hz7016 猪胆盐 100g AR
hz7017 三号胆盐 100g AR
hz7018 五号胆盐 100g AR
hz7019 去氧胆酸钠 100g AR
hz7020 大豆卵磷脂（粉末） 100g AR
hz7021 可溶性淀粉 500g AR
hz7022 蔗糖 500g AR
hz7023 蕃茄粉 100g AR
hz7024 甘油磷酸钠 250g AR
hz7025 牛血白蛋白 100g AR
hz7026 消化血清粉 250g AR
hz7027 干酪素 25g AR