D-葡萄糖-6-磷酸 二钠盐 水合物， 3671-99-6，

大肠杆菌glgC基因的克隆、序列分析与定点突变

摘要：通过PCR，从E.coli K12 Y1090株系中扩增获得glgC基因，插入pUC19的PstI和SacI 位点之间，得到重组质粒pAGP。对所克隆的glgC基因进行全序列测定，结果表明，与已发表的序列相比，有7个核苷酸发生了改变，核苷酸顺序的同源性为99.4 %; 推导的氨基酸序列的同源性为99.2 %, 其中，第296位由赖氨酸变为谷氨酸。通过寡核苷酸介导的定点诱变，将第1007位核苷酸由G变为A，从而使第336位氨基酸由甘氨酸变为天门冬氨酸，将此glgC的突变基因定

独体—基于纤连蛋白类型Ⅲ结构域框架的抗体模拟 Akiko Koide and Shohei Koide

ml 水中混合，灭菌。冷却至 50°C，并加入 5 ml 50% 葡萄糖、1 ml 1 mol/L 硫酸镁和 50 μl 1 mol/L 氯化钙。 ( 6 ) 抗生素最终浓度：100 μg/ml 氨苄青霉素（Ap)；30 μg/ml 氯霉素和 10 μg/ml 四环素（Tc )。 ( 7 ) 基本硫酸卡那霉素（Km ) 板：将 6 g 菌用琼脂糖混入 320 ml 水中并灭菌，然后冷却至 50°C。在另外一瓶中加入 4.2 g 磷酸氢二钾、1.8 g 磷酸二氢钾、0.4 g 硫酸

大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶E292对于氨基酰化活性的作用

双酶切后，嵌入表达载体pTrc-99B的NcoI和HindIII两个酶切位点间的切口内。得到的LeuRS 6个变种酶基因的正确性用DNA测序证实。 2. LeuRS及其变种酶基因的表达和纯化     1) 将含有LeuRS及其六个变种酶LeuRS-E292K，LeuRS-E292F，LeuRS-E292S，LeuRS-E292D，LeuRS-E292Q，LeuRS-E292A的基因的重组质粒转化到在大肠杆菌菌株TG1中，挑选含有正确质粒的转化子至5 mL氨节