- ¥625
- 七海生物
- 上海
- RPE001
- 2026年01月06日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 规格：
500U
尿嘧啶DNA糖基化酶Uracil-DNA glycosylase（UNG酶）
产品概述
UNG酶可选择性水解断裂含有dU的双链或单链DNA中的尿嘧啶糖苷键，对RNA无活力，主要应用于PCR扩增产物的防污染。本UNG酶是自E.coli 表达、纯化的重组蛋白酶。
酶活性单位定义
在37℃条件下反应 1小时，从含有dU的双链或单链DNA中底物中释放1nmolde 的dU 所需要的酶量为一个活性单位。
酶储存缓冲液
20 mM Tris-HCl buffer containing 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 50 mM NaCl and 50% glycerol (v/v), pH 7.5
使用说明
Taq酶与UNG酶的反应缓冲液和酶储存液可以通用，一个50uL的反应体系，通常加入0.2-1U。
酶纯度
> 95%, as determined by SDS-PAGE（未检测到DNA内切酶和外切酶活力），94℃处理2分钟，UNG酶完全失去活力。
PCR反应体系配制实例
| 反应液组分 | 加量 |
|---|---|
| 5X PCR Buffer | 5 µl |
| dU plus dNTP Mix | 1 µl |
| Primer1（10 µM） | 0.5 µl |
| Primer2（10 µM） | 0.5 µl |
| Taq | 0.3 µl |
| UNG | 0.2-0.5 µl |
| 模板（含尿嘧啶的DNA） | 1 µl |
| 蒸馏水 | 至25 µl |
结果
M：5000 bp DNA Ladder MarkerLane 1 - 4: 0.2-0.5µL UNG酶
Lane 5: 不加UNG酶
结果显示：不加UNG酶，含尿嘧啶的DNA模板能扩增出特异条带；添加不同浓度梯度的UNG酶，都能很好的去除含尿嘧啶的DNA。
包装规格
| 产品货号 | 产品规格 | 产品价格 |
|---|---|---|
| RPE001-100 | 500U | 625元 |
| RPE001-500 | 2500U | 询价 |
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- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶
PCR 酶数量如此之多，选择正确的酶可能是一项挑战。用于扩增 DNA 的各种酶的保真性、扩增速度和特异性各不相同。以下三个问题可以帮助您解答选择 PCR 酶时需要重点关注的因素。 Q 1：您需要确保序列准确性吗？ 有时您只需要检测 PCR 产物或估算其大小，例如在对小鼠进行基因分型或筛选重组克隆时。对于这种类型的常规 PCR 分析，您应该使用标准的热稳定 DNA 聚合酶（如 Taq DNA 聚合酶）来确认目的 DNA 存在与否。 但是，如果要执行克隆实验或下一代测序（NGS），那么准确性至关
A Protocol for Site-Directed Mutagenesis Employing a Uracil-Containing Phagemid Template
two key enzymes, dUTPase (dut) and uracil N-glycosylase (ung) , will synthesize DNA with a small number of uracil bases substituted for thymine. Uracil containing single-stranded DNA (ssDNA) prepared from this dut − , ung − host strain can be used
DNA 序列的改变称为突变, 这将导致相关蛋白质的序列变化。 DNA 上特定核苷的取代技术称作基因定位突变法 (site directed mutagenesis)。 通过病酶动物将突变的基因导入微生物体内即可产生非天然蛋白. 这种方法在研究蛋白质中特定氨基酸的功能上极为有价值。与定位突变不同, 在 PCR 中增加 Mg2 离子可产生随机点突变; 高盐度降低了 DNA 聚合酶的再现精度。突变频率可由离子浓度控制。这种方法称作"易错 PCR"。将突变基因重组在加速产生多样性方面较定位突变效率更高
