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生长素GHRELIN放免试剂盒操作说明书

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  • hz-10034
  • 2025年07月07日
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      上海沪震

    生长素GHRELIN放免试剂盒操作说明书
    GHRELIN HY-10034 RIA KIT
    GHRELIN是一种含28个氨基酸残基的脑肠肽,主要由胃黏膜的内分泌细胞分泌,是生长激素促分泌素受体(GHS-R)的一种内源性配体,1999年由日本国立循环器病中心Kojima等[1]人从小鼠和人的胃组织中成功分离并鉴定.Ghrelin系由28个氨基酸构成的多肽,能够和GHS-R结合而刺激生长激素GH的分泌.就目前的研究报道来看,Ghrelin除调节生长激素分泌外,还在能量平衡、胃功能、心血管系统以及肿瘤生长等诸多方面表现出重要的生物学效应.
    生长素GHRELIN放免试剂盒操作说明书标本采集:采血前试管内加放抑肽酶30ul/5ml(含150 IU以上)和10%EDTA.Na2 30uL,采血后立即置冰中,30分钟内4℃下2000转/分,离心15分钟取血浆置-20℃待测,可保存3-6个月。
    药盒组成:
    1、GHRELIN抗体一瓶。 2、125I-GHRELIN 标记一瓶。
    3、缓冲液一瓶。 4、分离剂(第二抗体)一瓶。
    5、GHRELIN标准品1瓶,倍比稀释浓度为:10、 20、40、80、 160、320、640、1280ng/ml
    生长素GHRELIN放免试剂盒操作说明书测定方法:
    ghrelin ­ RIA 操作程序 (单位:ul)
    ————————————————————————————
    试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品
    ————————————————————————————
    缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
    标 准 品 —— —— —— 100 ——
    样 品 —— —— —— —— 100
    抗 体 —— —— 100 100 100
    125I-ghrelin 100 100 100 100 100
    ————————————————————————————
    摇匀,4℃ 24小时
    ————————————————————————————
    分 离 剂 —— 500 500 500 500
    ————————————————————————————
    混匀,室温放置20分钟,4℃3500转/分 离心15分钟,去上清,测定沉淀cpm值。
    生长素GHRELIN放免试剂盒操作说明书结果计算:
    以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,
    在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果.
    注意事项:
    本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
    本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
    本月药盒标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
    本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
    测定前,血浆标本推荐过C18拄。
    附:血浆标本过柱步骤:
    1、取0.5ml血浆和0.5ml含1%的TFA(缓冲液A ),在4℃下3500转/分 离心20分钟,取上清。
    2、在含60%乙晴溶液中加1%TFA,即为缓冲液B,将缓冲液B 3ml对Sep-Pak C18 柱进行平衡,接着用缓冲液A 3ml 冲洗。
    3、将1处理的上清血浆缓慢注入Sep-Pak C18柱中。
    4、用缓冲液A 5ml 以1ml/2分钟速度淋洗Sep-Pak C18 柱。
    5、再用缓冲液B 3ml淋洗Sep-Pak C18,速度为1ml/3分钟,并收集上述淋洗液。
    6、将上述淋洗液全部分别装入10ml西林瓶中,-42℃ 冷冻干燥 ,备用。
    7、取干燥后的西林瓶用500 ul 0.05M PH 7.4 PB 进行溶解,并在振荡器上振荡3分钟。实验
    时取200ul进行加样。操作步骤见说明书。
    Sep-Pak C-18: Waters.inc. Massachusetts.USA TFA:SIGMA .CO .USA 药盒不提供上述二种
    试剂(或材料)。
    正常参考值:55.25-95.140ng/ml 78.25±11.29ng/ml
    本月药盒参考数据:
    ————————————————————————————————
    T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8
    ————————————————————————————————
    CPM
    ————————————————————————————————
    N/T% B0/T% B/ B0 %
    ———————————————————————————————— 中文名称:人硫酸酯酶2(SULF2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Sulfatase 2 (SULF2)
    中文名称:人角膜蛋白(KERA)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Ke英文名称:Ratocan (KERA)
    中文名称:人艾杜糖-2-硫酸酯酶(IDS)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Iduronate-2-Sulfatase (IDS)
    中文名称:人中间α-球蛋白抑制因子H5(ITIH5)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Inter Alpha-Globulin Inhibitor H5 (ITIH5)
    中文名称:人中间α-球蛋白抑制因子H2(ITIH2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Inter Alpha-Globulin Inhibitor H2 (ITIH2)
    中文名称:人中间α-球蛋白抑制因子H1(ITIH1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Inter Alpha-Globulin Inhibitor H1 (ITIH1)
    中文名称:人CD72分子(CD72)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 72 (CD72)
    中文名称:人血浆谷胱甘肽过氧化物酶(GPX3)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Glutathione Peroxidase 3, Plasma (GPX3)
    中文名称:人前蛋白转化酶枯草溶菌素5(PCSK5)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 5
    中文名称:人绒毛膜促性腺激素α肽(CGα)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Chorionic Gonadotropin Alpha Polypeptide (CGa)
    中文名称:人刺猬因子相互作用蛋白(HHIP)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Hedgehog Interacting Protein (HHIP)
    中文名称:人糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D1(GPLD1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Glycosylphosphatidylinositol Specific
    中文名称:人免疫球蛋白A1(IgA1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Immunoglobulin A1 (IgA1)
    中文名称:人免疫球蛋白A2(IgA2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Immunoglobulin A2 (IgA2)
    中文名称:人D-氨基酸氧化酶激活因子(DAOA)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for D-amino Acid Oxidase Activator (DAOA)
    中文名称:人神经调节素4(NRG4)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Neuregulin 4 (NRG4)
    中文名称:人神经调节素3(NRG3)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Neuregulin 3 (NRG3)
    中文名称:人胰岛素样蛋白3(INSL3)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Insulin Like Protein 3 (INSL3)
    中文名称:人线粒体转录因子A(TFAM)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Transcription Factor A, Mitochondrial (TFAM)
    中文名称:人CD19分子(CD19)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 19 (CD19)
    中文名称:人唾液酸结合Ig样凝集素2(SIGLEC2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 2 (SIGLEC2)
    中文名称:人封闭蛋白3(CLDN3)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Claudin 3 (CLDN3)
    中文名称:人果糖二磷酸醛缩酶C(ALDOC)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Aldolase C, Fructose Bisphosphate (ALDOC)
    中文名称:人高迁移率族AT Hook蛋白1(HMGA1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for High Mobility Group AT Hook Protein 1 (HMGA1)
    中文名称:人高迁移率族AT Hook蛋白2(HMGA2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for High Mobility Group AT Hook Protein 2 (HMGA2)
    中文名称:人己糖激酶2(HK2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Hexokinase 2 (HK2)
    中文名称:人蛋白酪氨酸磷酸酶ⅣA3(PTPⅣA3)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Protein Tyrosine Phosphatase Type IVA 3
    中文名称:人CREB调节转录辅激活因子3(CRTC3)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for CREB Regulated Transcription Coactivator 3
    中文名称:人环指蛋白39(RNF39)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Ring Finger Protein 39 (RNF39)
    中文名称:人组胺H4受体(HRH4)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:ELISA Kit for Histamine Receptor H4 (HRH4)

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    • 实验操作

      ,不能得到足够的菌量来抽提质粒,摇菌时间一般 12-14 小时为宜。 ③质粒属于低拷贝类型,导致收集的细菌量过少。 ④提取时菌量过多:容易导致裂解不充分,且容易超过硅胶膜柱的承载上限,最终使得质粒提取效率降低,建议参考提取试剂建议的菌液量来提取。 ⑤质粒提取实验操作不当:比如在加入缓冲液重悬菌体时,菌体没有充分分散悬浮,导致后续裂解不充分。为指示菌体是否充分裂解,可以考虑在重悬缓冲液中加入指示剂(QIAGEN 质粒提取试剂中均有配备 LyseBlue 指示剂),均匀蓝色指示悬浮充分。 ⑥试剂使用

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