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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 克隆性:
多克隆
- 抗体英文名:
Alkaline Phosphatase-conjugated AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG,Fc fragment specific
- 抗体名:
碱性磷酸酶AP标记亲和纯化山羊抗豚鼠IgG二抗,与Fc片段特异性反应
- 规格:
1ml
【产品形式】:艾美捷为您提供的碱性磷酸酶AP标记亲和纯化山羊抗豚鼠IgG二抗,与Fc片段特异性反应产品为冻干粉状态,建议将该冻干粉保存在2-8°C,准备用时,根据指示的体积加入三蒸水,产品在2-8°C条件下,未稀释的液体保质期为6周,每天准备新鲜的工作液。如果溶解后想延长保存期,加入等体积的甘油(ACS级别或更好的)使终浓度为50%,保存在-20°C。另外也可以在没有甘油时直接分装,并冰冻在-70°C或以下,避免反复冻融。保质期为收到货物后至少1年,合适的保存方式可以延长保质期。
【背景资料】:AP(Alkaline Phosphatase,,碱性磷酸酶)属于同源二聚体蛋白,分子量为56KDa。碱性磷酸酶是一种能够将对应底物去磷酸化的酶,即通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去,并生成磷酸根离子和自由的羟基,这类底物包括核酸、蛋白、生物碱等。而该脱去磷酸基团的过程被称为去磷酸化或脱磷酸化。碱性磷酸酶也是目前免疫诊断试剂产品最常用的标记酶之一。与辣根过氧化物酶(HRP)相比,AP用作标记酶的优点是:稳定性高、灵敏度高,缺点是成本高,标记困难。碱性磷酸酶的色原底物最常用的是对硝基苯磷酸盐(pNPP)。pNPP在碱性磷酸酶的作用下生成对硝基酚(pNP),其在405nm处有最大吸收。BCIP/NBT也是碱性磷酸酯酶的常用底物。在碱性磷酸酯酶的催化下,BCIP会被水解产生强反应性的产物,该产物会和NBT发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。
Jackson ImmunoResearch公司是美国著名的二抗及相关免疫产品生产厂商,其产品包括各种纯化和标记的二抗(AMCA、Cy2、FITC、Cy3、TRITC、RRX、TR、 Cy5、长臂生物素、辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶标记)、免疫球蛋白、血清等。由于其产品效价高、种类全、价格实惠,长期以来深受全球广大科研用户的喜爱,一直享有二抗金标准的赞誉。作为多家知名品牌的中国代理或区域代理,艾美捷向您推荐Jackson的各种标记的二抗产品,包括HRP及AP酶标二抗、FITC/Rhodamine /Cy系列/DyLight系列等荧光二抗等均为原装进口包装,高效敏感,能为您提供最值得信赖的抗体产品保障和售后服务。
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文献和实验预培养于含有叠氮钠和二抗来源物种正常血清的缓冲液中。 注意:当使用的是带标记的二抗时,千万不能用一抗来源物种的正常血清和 IgG 来封闭。如果血清中的免疫球蛋白非特异性的结合到样品上,他们会被带有标记的二抗识别,导致背景过高。 牛血清白蛋白( BSA )和奶粉是最为常用的封闭液,它们可能含有 IgG, 除了牛抗羊 IgG 外,许多二抗如抗牛,抗山羊,抗绵羊与牛 IgG 有较强的反应。因此,使用 BSA 或奶粉封闭或稀释抗体会增加背景或降低抗体效价。推荐用来自二抗的物种的正常血清( 5% v
、特异性强,非特异性背景反应低。其缺点是,每种抗原必须分别用其抗体的酶标记物,且敏感性较间接法低。 (2)间接法 间接法是先用未标记的特异性抗体(一抗)与标本中相应抗原反应,再用抗特异性抗的酶标记抗体与结合在抗原上的一抗(即特异性抗体)反应。例如,第一次使用的特异性抗体(一抗)是由家兔产生的,则第二次使用的抗体(二抗)必须是酶标记的抗兔的免疫球蛋白,常用的羊抗兔lgG的酶标记物(即酶标羊抗兔IgG)。然后与直接法相同,与底物反应、显色、将抗原的性质,部位和含量
抗体上,间接法是将酶标记在第二抗体上,检测组织细胞内的特定抗原物质。间接法所用的第一抗体是对组织细胞内某种抗原的特异性抗体(80%~90%的抗血清系由家兔制得,而绝大数单克隆抗体系由小鼠制备);第二抗体则为第一抗体(家兔/小鼠的IgG)的抗体。所以,只要不同的第一抗体均来自同一种属,同一标记的第二抗体就能用来显示其不同特异性抗原的存在,这样可避免了直接法中标记每一种第一抗体的麻烦,并且提高了方法的敏感度。目前的ICC染色中,以间接法为常用,在此着重介绍间接法的染色程序。 2.染色程序
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