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文献和实验peptides is also described.MATERIALSReagentsAcetic acid (100 mM)Ammonium bicarbonate (50 mM, pH 8.0)Calf intestinal alkaline phosphataseCarboxypeptidase Y (1 µg/µL in H2O)EDTA (100 mM in H2O, pH 8.0)Ferric chloride (FeCl3) (100 mM)Gallium chloride (GaCl
Steady State ATPase Assays Coupled Enzyme System
Motor protein (>95% purity; 15-20 µM) Cuvettes (200 µL volume, 10 mm path length) 0.5 M Tris-OAc, pH 7.5 10 mM MgCl2 10 mM DTT
DNA结合的引物长度足够的条件下,其5’端碱基可不与模板DNA互补而呈游离状态,因此可在引物5’端加上限制性内切酶位点、启动子序列或其它序列等以便于PCR产物的分析克隆等,引物的5’端最多可加10个碱基而对PCR反应无影响。 PCR反应系统总体积10 μl,模板DNA的量为植物总DNA 10 ng。 PCR反应体系(10 μl) 各对引物的复性温度不一样,用x代替。延伸时间用y代替,其中片断长度如果大于1kb,y为1.5 min;大于2kb,y为2.0 min;片断长度如果小于1kb,y
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