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文献和实验Nature(IF=48.5)具有代谢功能的人成体肝细胞类器官的构建!
33342染色。3例供体样本均获得了相似结果。 b.含OSM或IL-6的扩增培养基中,原代肝细胞来源人肝细胞类器官的扩增情况。细胞数通过传代比例和基于ATP的细胞计数进行估算。每个点代表一次传代操作。3个类器官细胞系在最初3个月内,约每2周传代一次,传代比例为1:3~1:12;“x”代表传代失败。PY39a、PY53、PY61分别代表39岁、53岁、61岁的供体。 c.单个原代肝细胞在OSM诱导下类器官生长的延时成像图。同一类器官在相同放大倍数下拍摄。2例供体样本均获得了相似结果。 d.OSM对人肝细胞
【五分钟讲实验】从乳鼠心脏到会跳的细胞:大鼠原代心肌细胞分离培养入门
缺血和机械损伤对细胞活性的影响。 3. 心室组织剪碎 将心室组织转移至无菌培养皿中,用眼科剪或无菌剪刀剪成约 1 mm³ 组织块。 组织块大小应尽量均一,以保证后续酶消化充分且批间稳定。 剪碎过程中避免过度碾压组织,以减少心肌细胞机械损伤。 4. 分批酶消化 采用低浓度胰酶、胶原酶 II、胰酶-胶原酶联合体系,或 pancreatin/collagenase 体系进行分步消化。组织块在 37℃ 条件下温和振荡或间断混匀,每轮消化后收集细胞悬液,并立即加入含血清培养基终止酶反应。 消化
和 IEF 的离液剂和去垢剂。 如前所述,IEF 中的制约因素限制了化学药品的选择,在 pH 波动范围内样品溶液不能有净电荷产生,如非离子型或两性离子化合物。这限制了酰胺和尿素类离液剂的选择,胍和脒在 pH 12 以下是带电荷的。尿素作为可行的离液剂已经使用了很长一段时间了。最近,加入硫脲的尿素离液剂不仅增加蛋白溶解性 [5] 但而且还限制蛋白酶活性 [6] 。在溶解过程中离液剂的作用是打破样品中的各种分子非共价的相互作用(如氢键,偶极-偶极的相互作用,以及疏水相互作用)并且使蛋白质展开。虽然离子
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