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yuanmu
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上海远慕生物有限公司
品牌:Omega
货号:M11-01
产品名称:50bp DNA Ladder(250ul)
50bp DNA Ladder
50bp DNA Ladder(250ul)(Omega PCR与RT-PCR相关) 上海远慕生物有限公司专业供应各种生物试剂、生化试剂,单抗多抗抗体,各种二抗,标记抗体,抗体抗原,蛋白多肽产品,Elisa酶联免疫试剂盒,各种细胞株、细胞系,各种动物血清,金标试剂盒,放免试剂盒,培养基,毒素 的产品, 实时价格和产品详细说明,敬请来电咨询!
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文献和实验1 0.1-0.5µM Primer 2 0.1-0.5µM 10X Reaction buffer 1X Magnesium 1.0-3.0mM dNTP mix 200 mM each dNTP Thermostable DNA polymerase 1-4 units/100 ml reactionRT-PCR基础 RT-PCR将以RNA为模板的cDNA合成同PCR结合在一起,提供了一种分析基因表达的快速灵敏的方法。RT-PCR用于对表达信息进行
性由两个人工合成的引物序列决定。反应分三步: A.变性:通过加热使 DNA 双螺旋的氢键断裂,形成单链 DNA; B.退火:将反应混合液冷却至某一温度,使引物与模板结合。 C.延伸:在 DNA 聚合酶和 dNTPs 及 Mg2+存在下,退火引物沿 5‘ —— 3’ 方向延伸。 以上三步为一个循环,如此反复。 3. 逆转录酶和 RT-PCR 逆转录酶(reverse transcriptase)是存在于 RNA 病毒体内的依赖 RNA 的 DNA 聚合酶,至少具有以下三种活性: (1)依赖 RNA
C30min(3ul?多加点没关系) 7)蛋白酶K37C30min(3ul?多加点没关系)再浓缩浓缩 8)6xloading buffer 混合根据小片段液量自己选择(6-10ul)0.5xTBE里跑电泳 注意:DNA别降解了,混匀时tip头口剪宽一些,组织要多一些。 另:你们问我如何避免样品溢出,好像溢出不多啊,一丝一缕而已,至少我的ladder跑得出来,就把胶放在电泳槽里后再加TBE吧,不至于全流出来吧,还有就是用6X的loading buffer,可能可以增加比重,这也是书上的做法。要不把胶
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