大鼠B因子(BF) 检测试剂盒

大鼠B因子(BF) 检测试剂盒

本试剂仅供研究使用

试验原理：

BF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知BF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BF和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BF的活性浓度呈比例关系。

试剂盒内容及其配制

自备材料

1． 蒸馏水。

2． 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3． 振荡器及磁力搅拌器等。

安全性

1． 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

大鼠B因子(BF) 检测试剂盒操作注意事项

1． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

大鼠B因子(BF) 检测试剂盒样品收集、处理及保存方法

1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、 保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

试剂的准备

1． 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：

2． 洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。

大鼠B因子(BF) 检测试剂盒操作步骤

1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5． 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。

性能

1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性：不与人其它细胞因子反应。

3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

4.局限性：6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。

结果 判 断 与 分 析

1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的BF标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的BF含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

3、检测值范围：0-400ng/ml

4、敏感度： 1.0ng/ml
中文名称：人脱氧核糖核酸酶Ⅹ(DNASEⅩ)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Deoxyribonuclease X (DNASEX)
中文名称：人N-型电压依赖钙离子通道α1B亚基(CACNα1B)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Calcium Channel, Voltage Dependent, N-
中文名称：人磷酸二酯酶1A(PDE1A)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Phosphodiesterase 1A, Calmodulin Dependent (PDE1A)
中文名称：人肽基精氨酸脱亚氨酶Ⅱ(PADI2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Peptidyl Arginine Deiminase Type II (PADI2)
中文名称：人嘌呤能受体P2Y1(P2RY1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Purinergic Receptor P2Y, G Protein Coupled 1 (P2RY1)
中文名称：人蛋白脂质蛋白2(PLP2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Proteolipid Protein 2, Colonic Epithelium Enriched
中文名称：人含杆状病毒IAP重复蛋白7(BIRC7)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Baculoviral IAP Repeat Containing Protein 7
中文名称：人柯萨奇病毒腺病毒受体(CXADR)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Coxsackie Virus And Adenovirus Receptor (CXADR)
中文名称：人胎盘碱性磷酸酶样蛋白2(ALPPL2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Alkaline Phosphatase, Placental Like Protein 2
中文名称：人胞苷脱氨酶(CDA)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Cytidine Deaminase (CDA)
中文名称：人碘甲腺原氨酸脱碘酶Ⅱ(DIO2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Deiodinase, Iodothyronine, Type II (DIO2)
中文名称：人基质金属蛋白酶17(MMP17)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 17 (MMP17)
中文名称：人白介素1ε(IL1ε)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Interleukin 1 Epsilon (IL1e)
中文名称：人β-胡萝卜素-15,15'-单加氧酶1(βCMO1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Beta-Carotene-15,15'-Monooxygenase 1
中文名称：人胰高血糖素样肽1受体(GLP1R)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Glucagon Like Peptide 1 Receptor (GLP1R)
中文名称：人绒毛膜促性腺激素β肽(CGβ)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Chorionic Gonadotropin Beta Polypeptide (CGb)
中文名称：人赖氨酰氧化酶样蛋白3(LOXL3)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Lysyl Oxidase Like Protein 3 (LOXL3)
中文名称：人Janus激酶3(JAK3)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Janus Kinase 3 (JAK3)
中文名称：人含EGF样模块粘蛋白样激素受体1(EMR1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for EGF Like Module Containing Mucin Like Hormone
中文名称：人腺苷酸环化酶5(ADCY5)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Adenylate Cyclase 5 (ADCY5)
中文名称：人平滑肌肌动蛋白γ2(ACTγ2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Actin Gamma 2, Smooth Muscle (ACTg2)
中文名称：人成骨生长肽(OGP)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Osteogenic Growth Peptide (OGP)
中文名称：人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Glucose Oxidase (GOD)
中文名称：人Ⅱ类主要组织相容性复合体DRβ1(MHCDRβ1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Major Histocompatibility Complex Class
中文名称：人维甲酸X受体γ(RXRγ)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Retinoid X Receptor Gamma (RXRg)
中文名称：人谷胱甘肽S转移酶μ1(GSTμ1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Glutathione S Transferase Mu 1 (GSTm1)
中文名称：人促肾上腺皮质素释放激素受体2(CRHR2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Corticotropin Releasing Hormone Receptor 2
中文名称：人促肾上腺皮质素释放激素受体1(CRHR1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Corticotropin Releasing Hormone Receptor 1
中文名称：人紧密连接蛋白2(TJP2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Tight Junction Protein 2 (TJP2)