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F-12 nutrient medium
DMEM / F-12（1∶1）培养基 （含15mM HEPES）培养条件：
完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。
培养条件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%
DMEM / F-12（1∶1）培养基 （含15mM HEPES）制备:
1. 分离和培养宿主细胞；
2. 通过病毒介导或者其它的方式将多能性相关的基因导入宿主细胞；
3. 将病毒感染后的细胞种植于饲养层细胞上，并在ES细胞专用培养体系中培养，同时在培养期间根据需要加入相应的小分子物质以促其重编程；
4. 出现ES样克隆后进行IPS细胞的鉴定（细胞形态、特定基因的表达、表观遗传修饰、体外分化潜能等方面）。
细胞生长：贴壁生长
细胞形态：上皮样；多角形
细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次
DMEM / F-12（1∶1）培养基 （含15mM HEPES）传代方法：
收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
一．如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
二．如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：
1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。1:3~1:6传代；2~3天1次
DMEM / F-12（1∶1）培养基 （含15mM HEPES）相关产品如下：hz10191 小鼠淋巴瘤细胞(NK靶细胞) YAC-1 细胞
hz10192 小鼠淋巴瘤细胞,Yac-1细胞,
hz10193 小鼠淋巴瘤细胞,Nb2－11细胞
hz10194 小鼠淋巴瘤细胞,L5178Y细胞
hz10195 小鼠淋巴瘤细胞,EL4细胞
hz10196 小鼠淋巴瘤细胞,EL4.IL-2细胞
hz10197 小鼠淋巴结血管上皮样细胞,SVEC4-10细胞
hz10198 小鼠巨噬细胞,ANA-1细胞,
hz10199 小鼠精母细胞
hz10200 小鼠结肠腺癌细胞,CT-26细胞,
hz10201 小鼠结肠癌细胞,CT26.WT细胞,
hz10202 小鼠结肠癌细胞,CMT93细胞
hz10203 小鼠结肠癌 C26细胞,
hz10204 小鼠浆细胞瘤 MPC-11细胞
hz10205 小鼠间充质干细胞系 C3H10细胞
hz10206 小鼠畸胎瘤细胞,P19细胞,
hz10207 小鼠畸胎瘤细胞,F9细胞
hz10208 小鼠红白血病细胞,MEL细胞
hz10209 小鼠黑色素瘤细胞,B16细胞,
hz10210 小鼠黑色素瘤细胞,B16F1细胞
hz10211 小鼠黑色素瘤细胞,B16-F0-EGFP细胞
hz10212 小鼠黑色素瘤细胞,B16BL6细胞
hz10213 小鼠黑色素瘤高转移细胞,B16F10细胞
hz10214 小鼠黑色瘤细胞,B16细胞
hz10215 小鼠骨髓细胞,FDC-P1细胞
hz10216 小鼠骨髓瘤细胞,SP2/0细胞
hz10217 小鼠骨髓瘤细胞,Sp2/0-Ag14细胞
hz10218 小鼠骨髓瘤细胞,P3X63Ag8细胞
hz10219 小鼠骨髓瘤细胞,P3-X63-Ag8.653细胞
hz10220 小鼠骨髓瘤细胞,P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]细胞
hz10221 小鼠骨髓瘤细胞,NS1细胞
hz10222 小鼠骨髓瘤细胞,FO细胞
hz10223 小鼠骨髓瘤细胞,Fox-NY细胞
hz10224 小鼠骨髓瘤细胞
hz10225 小鼠骨髓瘤B淋巴细胞,SP2/MIL-6细胞
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文献和实验无血清培养的首选是AIM V培养基（SFM）。在开始进行新的细胞培养时，可以参考下表所列的条件： 细胞系 细胞类型 种 组织 推荐使用的培养基 293 成纤维细胞 人 胚胎肾 MEM, 10% 热灭活马血清 3T6 成纤维细胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% 胎牛血清 A549 上皮细胞 人 肺癌 F-12K, 10%胎牛血清 A9 成纤维细胞 小鼠 结缔组织 DMEM, 10%胎牛血清 AtT-20 上皮细胞 小鼠 垂体
胶质细胞层的上面然后运用旋转摇床以260rpm 18小时摇荡分离，通过30μm的尼龙网过滤，然后细胞悬液接种到含无血清培养基的培养皿中。培养基成分：DMEM-Ham‘s F-12混合物（1:1），10mM HEPES，0.1%牛血清蛋白，25μg/mL 人铁转蛋白，30nM三碘甲状腺氨酸，20nM氢化可的松，20nM黄体酮，10nM 维生素H，5μg /mL胰岛素，16μg/mL腐胺，30nM硒，50U/mL 青霉素和50μg/mL 链霉素，还含有2.5ng/mL 血小板源性生长因子AA和2.5ng/mL
mg/ml 链霉素－－50mg/ml 最后用DF12添加到100ml即可 2.各类小鼠胚胎癌细胞系培养基 DMEM/F12 1:1混合成1000ml NaHCO3 2.4g HEPES(1.5M) 10.0ul 硒酸（5*10-6M) 10.0ug 纤粘连蛋白 1ug/cm2(37度作用15－30分钟） 胰岛素 1000.0ug 转铁蛋白 5000.0ug 3.NIH3T3小鼠成纤维细胞培养基 DMEM/F12 1:1混合成1000ml HEPES 15mM 大豆胰
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