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F-12 nutrient medium
DMEM / F-12（1∶1）培养基 （不含15mM HEPES）培养条件：
完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。
培养条件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%
DMEM / F-12（1∶1）培养基 （不含15mM HEPES）制备:
1. 分离和培养宿主细胞；
2. 通过病毒介导或者其它的方式将多能性相关的基因导入宿主细胞；
3. 将病毒感染后的细胞种植于饲养层细胞上，并在ES细胞专用培养体系中培养，同时在培养期间根据需要加入相应的小分子物质以促其重编程；
4. 出现ES样克隆后进行IPS细胞的鉴定（细胞形态、特定基因的表达、表观遗传修饰、体外分化潜能等方面）。
细胞生长：贴壁生长
细胞形态：上皮样；多角形
细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次
DMEM / F-12（1∶1）培养基 （不含15mM HEPES）传代方法：
收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
一．如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
二．如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：
1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。1:3~1:6传代；2~3天1次
DMEM / F-12（1∶1）培养基 （不含15mM HEPES）相关产品如下：hz10156 小鼠前成骨细胞,MC-3T3细胞
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文献和实验蛋白产品货号 基础培养基 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 DMEM-F12 penicillin-streptomycin penicillin 100U/ml, streptomycin 100μg/ml dFBS（v/v） - 0.2% 2% 2% - L-glutamine 2mM B-27
mg/ml 链霉素－－50mg/ml 最后用DF12添加到100ml即可 2.各类小鼠胚胎癌细胞系培养基 DMEM/F12 1:1混合成1000ml NaHCO3 2.4g HEPES(1.5M) 10.0ul 硒酸（5*10-6M) 10.0ug 纤粘连蛋白 1ug/cm2(37度作用15－30分钟） 胰岛素 1000.0ug 转铁蛋白 5000.0ug 3.NIH3T3小鼠成纤维细胞培养基 DMEM/F12 1:1混合成1000ml HEPES 15mM 大豆胰
季青）； 5.细胞状态与特征简述:细胞呈梭型贴壁生长 1.细胞种类：人肝肿瘤细胞 2.培养的天数：复苏后12小时； 3.放大倍速：倒置显微镜 X10； 4.培养基种类：DMEM+10%小牛血清（杭州四季青）； 5.细胞状态与特征简述:细胞呈梭型贴壁生长 1.细胞种类：hepg22.1.5 2.培养天数：传代后第10天； 3.放大倍数：倒置显微镜 X20； 4.培养基种类：MEM+10%胎牛血清 5.细胞状态与特征简述：细胞贴壁生长 ，成团 1.细胞种类：hepg22.1.5 2.培养天数
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