人吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO) 检测试剂盒

人吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)

检测试剂盒

本试剂仅供研究使用 标本：组织匀浆

试验原理：

IDO试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知IDO浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将IDO和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中IDO活性浓度呈比例关系。

试剂盒内容及其配制

自备材料

1． 蒸馏水。

2． 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3． 振荡器及磁力搅拌器等。

安全性

1． 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作注意事项

1． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法

1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、 保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

试剂的准备

1． 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：

2． 洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。

操作步骤

1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5． 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。

局限

6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性：不与人其它细胞因子反应。

3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

结果 判 断 与 分 析

1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的IDO标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的IDO含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

3、检测值范围：0-400pg/ml

4、敏感度： 1.0pg/ml
中文名称：小鼠Kruppel样因子1(KLF1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Kruppel Like Factor 1, Erythroid (KLF1)
中文名称：小鼠胰岛素样蛋白3(INSL3)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Insulin Like Protein 3 (INSL3)
中文名称：小鼠锌指同源框蛋白1B(ZFHX1B)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Zinc Finger Homeobox Protein 1B (ZFHX1B)
中文名称：小鼠过氧化还原酶4(PRDX4)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Peroxiredoxin 4 (PRDX4)
中文名称：小鼠X-射线修复交叉互补蛋白6(XRCC6)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for X-Ray Repair Cross Complementing 6 (XRCC6)
中文名称：小鼠DNA修复蛋白RAD50(RAD50)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for DNA Repair Protein RAD50 (RAD50)
中文名称：小鼠印度刺猬因子(IHH)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Hedgehog Homolog, Indian (IHH)
中文名称：小鼠细胞色素P450家族成员7A1(CYP7A1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Cytochrome P450 7A1 (CYP7A1)
中文名称：小鼠高尔基蛋白73(GP73)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Golgi Protein 73 (GP73)
中文名称：小鼠甘露糖受体C2(MRC2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Mannose Receptor C Type 2 (MRC2)
中文名称：小鼠整合素α1(ITGα1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Integrin Alpha 1 (ITGa1)
中文名称：小鼠二酰甘油-O-酰基转移酶同源物1(DGAT1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Diacylglycerol-O-Acyltransferase
中文名称：小鼠Wolfram综合征蛋白1(WFS1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Wolfram Syndrome Protein 1 (WFS1)
中文名称：小鼠可溶性半乳糖凝集素3结合蛋白(LGALS3BP)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Lectin Galactoside Binding, Soluble 3
中文名称：小鼠ⅩⅤ型胶原(COL15)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Collagen Type XV (COL15)
中文名称：小鼠细胞外基质蛋白1(ECM1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Extracellular Matrix Protein 1 (ECM1)
中文名称：小鼠毒蕈碱型胆碱受体M2(CHRM2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Muscarinic 2 (CHRM2)
中文名称：小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Thymic Stromal Lymphopoietin (TSLP)
中文名称：小鼠L1-细胞粘附分子(L1CAM)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for L1-Cell Adhesion Molecule (L1CAM)
中文名称：小鼠白细胞弹性蛋白酶抑制因子(LEI)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Leukocyte Elastase Inhibitor (LEI)
中文名称：小鼠归巢关联细胞黏附分子(HCAM)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Homing Associated Cell Adhesion Molecule (HCAM)
中文名称：小鼠Ⅶ型胶原(COL7)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Collagen Type VII (COL7)
中文名称：小鼠D-多巴色素变位酶(DDT)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for D-Dopachrome Tautomerase (DDT)
中文名称：小鼠巯基丙酮酸硫转移酶(MPST)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Mercaptopyruvate Sulfurtransferase (MPST)
中文名称：小鼠双特异性磷酸酶1(DUSP1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Dual Specificity Phosphatase 1 (DUSP1)
中文名称：小鼠前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9
中文名称：小鼠补体成分4b(C4b)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Complement Component 4b (C4b)
中文名称：小鼠含铜胺氧化酶3(AOC3)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Amine Oxidase, Copper Containing 3 (AOC3)
中文名称：小鼠海藻糖酶(TREH)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Trehalase (TREH)
中文名称：小鼠丙酮酸羧化酶(PC)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Pyruvate Carboxylase (PC)