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文献和实验水研磨成匀浆,转移到 离心管 中,再用6mL 蒸馏水分次洗涤研钵,洗涤液收集于同一 离心管 中,放置0.5~1h 以充分提取,然后在4 000r/min 离心20min,弃去沉淀,上清液转入10mL 容量瓶,并以蒸馏水定容至刻度,即得待测样品提取液。 (2)测定:另取2 支10mL 具塞 试管 ,按下表取样。吸取提取液0.1mL(做一重复),放入具塞刻度 试管 中,加入5mL 考马斯亮蓝G-250 蛋白
4·2H2O溶解于100m1水中,加入0.5ml 2mol/LNaOH,加热至沸,并煮沸15min,冷却后补充无氨水100ml),4滴3%过氧化氢。放在电炉上蒸发,直至出现泡沫,然后降低温度以免泡沫溅到瓶颈上。继续用微火加热直至硫酸出现白色蒸汽。之后用球形玻璃塞塞上凯氏瓶口,增强火力,消化到溶液透明为止。冷却后向瓶中残留物加入10ml水。溶液转人50ml容量瓶中,用水冲洗残渣,并补加水到50ml,混匀。取25ml溶液放人烧杯中滴定。加1滴0.1%甲基橙溶液,冷却后,以2mol/LNaOH溶液
; 6、阴性血清 正式试验时1:10稀释; 7、生理盐水。 二、预实验 1、溶血素效价测定 用小试管做时,单位为ml;用血清稀释板做时,单位为滴。 (1)溶血素稀释 先将溶血素做1:1000基础稀释。见表1。 表1 溶血素稀释表(单位:滴) 稀释度 1:1000 1:2000 1:3000 1:4000
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