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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
6个月
- 英文名:
cALP Stain Kit
- 库存:
大量
- 供应商:
上海信誉
产品用途: 科研ELISA检测试剂盒.提供实验代测服务.
产品询价:你可以通过电话,邮件,传真或在线客户方式询价
检测种属:大小鼠,人,猪,豚鼠,兔子,牛,羊,鸡,鸭Elisa试剂盒等种属
产品样本:体液,血清,血浆,细胞培养上清液,尿液,组织匀浆,心房水标本等。
贮藏条件:试剂盒保存2-8℃,有效期6个月
碱性磷酸酶染液(偶氮偶联法,适用于细胞样本)安全性:1,避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。4.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。5.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。6.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。7.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。8.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。9.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。10.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。11.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。12.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
碱性磷酸酶染液(偶氮偶联法,适用于细胞样本)说明
1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任碱性磷酸酶染液(偶氮偶联法,适用于细胞样本)何影响。
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文献和实验碱性磷酸酶偶氮―耦连法 人工合成的磷酸萘酚盐经碱性磷酸酶水解后释放出萘酚,后者立即与重氮盐偶联生成不溶性偶氮色素。 1)孵育液配制 萘酚AS(或萘酚AS-MX) 10―25rug N,N―二甲基甲酰胺液 0.5ml 0.2mol/LTris盐酸缓冲液(pH 8.2―9.2) 50ml 坚牢蓝B(或BB、RR,或坚牢红TR
CaCl2 10ml 2% MgSO4 1ml 【步骤】 (1)将无菌的玻片放入培养皿中,传代时加入适量的细胞悬液,作细胞爬片,呆细胞长满玻片后取出。 (2)PBS冲洗后用冷丙醇固定10min,蒸馏水冲洗数次。 (3)入孵育液中,37℃孵育4-6h。自来水冲洗数次。 (4)2%硝酸钴中浸3-5min,蒸馏水洗数次。 (5)1%的硫化铵中2min,自来水冲洗,自然干燥,封固。 【结果】胞质中阳性反应呈现灰黑色颗粒或块状沉淀。 2 偶氮偶联法
性血小板减少性紫癜、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症、急性淋巴细胞白血病、阵发性睡眠性血红蛋白尿等。 中性粒细胞碱性磷酸酶的显示方法有偶氮偶联法和钙-钴法两种。前者的染色原理是血细胞内碱性磷酸酶在pH为9.4~9.6的条件下,将基质液中的α-磷酸萘酚钠水解,产生α-萘酚与重氮盐偶联形成灰黑色沉淀,定位于细胞质内酶活性所在之处。钙-钴法染色是碱性磷酸酶在碱性条件下将基质液中的β-甘油磷酸钠水解,产生磷酸钠。磷酸钠依次与硝酸钙、硝酸钴、硫化铵发生反应,形成不溶性棕黑色的硫化钴,定位于酶活性之处。 碱性磷酸酶主要
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