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北京鼎国
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文献和实验。 在超净台上,往感受态细胞中加入300μL Amp- LB培养基,小心吹打一下,使细胞悬浮在培养基中, 37℃ 250转 培养60min。 5.涂平板(超净台上操作) 在培养细胞的时候,继续在超净台开紫外灯灭菌,包括以下物品: 黄枪(量程为200μL或100μL)、已经灭菌过的黄枪头(没在外面开过的)、涂布棒、酒精、酒精棉球、打火机、酒精灯、记号笔、已经倒好的平板 一般涂布的菌液量为80-120μL/板,如果细胞浓度太浓或太稀,可以适当调整用量。 将涂布棒蘸上酒精,在酒精
细胞(NVN),核染色质着橘红色并呈正常结构;晚期凋亡细胞(NVA),核染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状。2、AO/EB染色及观察结果:取 20-100μl的1:100稀释的染色剂置于载玻片的贴壁细胞上室温下静置20min,PBS洗涤2-3遍,上覆盖玻片,荧光显微镜下观察结果并计数20-200个细胞。ym1051:1、能否提供具体实验步骤?2、您在文中所说的"1:100稀释的染色剂"是怎样稀释的?如何在载玻片上种上贴壁细胞?zhongyisheng:1、用1mlEP管稀释时,先取微量的染色剂,然后再取稀释
)→dH2 O(2×5min)→干燥(温箱,数小时过夜)→用铝箔包好,室温备用。 注意:制备和保存过程中避免污染。 经上述处理的载玻片一般可存放半年以上(4℃可更长)。 (五)硅鱼精子DNA的制备 (1)在50ml灭菌聚乙烯管中加入1g鲑精DNA,加入15ml DEPC水使其浸泡5min至2h; (2)加入2.5ml 2mol/L HCl,室温放置,DNA形成白色沉淀,充分振摇至沉淀物相互缠绕在一起,用吸头尖端使之形成一球团状(2~
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