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北京鼎国
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箱
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文献和实验。 28181 QIAquick 96 PCR Purification Kit——采用真空抽滤的方法,利用硅胶膜技术25分钟内从PCR反应体系中回收高纯度的DNA,回收率高达90%(100bp~10kb),可除掉 99.5 %的引物,无需另外去除石蜡油,无需乙醇沉淀,无需酚、氯仿等有机试剂。纯化产物可直接用于芯片点样或测序。 Telechem 公司:世界著名的芯片供应商,提供各种芯片方面的耗材和试剂。其PCR产物纯化试剂盒利用高级滤膜技术,具有价格低、通量高、速度快等优点。无需乙醇沉淀,无需酚、氯
总数= 243 平均细胞数/方格= 60.75 稀释倍数= 2 细胞数/ml:60.75 x 104 x 2 = 1.22 x 106 细胞数 /flask: 1.22 x 106 x 10ml = 12.2 x 106 存活率:225/243﹦92.6 % (三)MTT法测细胞相对数和相对活力 活细胞中的琥珀酸脱氢酶可使 MTT分解产生兰色结晶状甲赞颗粒积于细胞内和细胞周围。其量与细胞数呈正比,也与细胞活力呈正比。 l、细胞悬液以 1000rpm离心 10分钟,弃
℃,12000g,离心20min回收质粒沉淀。 12.弃上清,用70%的乙醇洗2次。 13.弃上清,倒扣于吸水纸上,尽量空干液体。 14.用3ml TE(pH8.0)溶解沉淀,移入1.5ml Eppendorf离心管中。 15.电泳检查DNA质量并定量。(必要的话,可以用胶回收的方法先纯化一下质粒再进行双酶切。) 二、pBlueScriptII的双酶切消化 1.以如下体系进行EcoRI酶切: pBSK(+)X µl(6µg) ddH2O174-X µl 10×Buffer E 20
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