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文献和实验神容易送神难!从多肽样品中去除去垢剂颇具挑战性,也很关键,因为即使是极低浓度的去垢剂也会污染仪器,干扰柱结合、洗脱和多肽离子化。 HiPPR其实是High Protein and Peptide Recovery的缩写,意味着蛋白及多肽的高效回收。离心柱或96孔离心板所用的HiPPR去垢剂去除树脂可从25-200 µL样品中高效去除去垢剂,从而改善LC-MS/MS和MALDI-MS分析的结果。 HiPPR去垢剂去除树脂是为1-100 µg/mL的蛋白浓度而优化的,可去
人 iPS 细胞体外分化为气道上皮肺类器官用于呼吸系统疾病研究应用以及iPSC操作指南
台中,使用体积设置为 10 µL的无菌 20 µL 移液器吸头从 60 mm 培养皿中6个较完整的类器官,并将其转移到 96 孔 U 型底板的 1 个孔中。 6. 将 96 孔板从解剖台转移到组织培养超净台中。 注意:为避免 ECM基质胶过早凝胶化,我们建议一次制备不超过 3 个细胞培养小室。 1. 将 60 µL 冷的 100%的减生长因子(GFR) ECM基质胶加入步骤 5 中的 96 孔板的每个孔中。通过移液器轻轻混合几次,避免产生任何气泡。 总体积 = 每孔130 µL。
,自来水下冲洗,晾干(或烘干)备用。如果不烘干就泡酸,那么96孔板残留的水分将稀释酸液,长期以往泡酸的效果下降。4、将晾干的96孔板泡酸(中强酸)过夜,捞起后自来水下冲洗10遍;双蒸水冲洗3遍。三蒸水冲洗3遍。烘干备用。泡酸时特别注意时间不要太长了,否则板子变黄,影响最后的OD值的测定。5、做实验前,96孔板至少在紫外灯下照射30分钟,但不能长期照射。紫外线长期照射可使板变黄,我的两块板放在超静台上忘了拿出来,一直照了两个星期,等我从超静台上取出板已经变成黄色。注:1、在实验中若你测得某一个孔的数值
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