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- 2025年09月26日
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- 详细信息
- 文献和实验
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北京鼎国
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箱
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文献和实验科研君们，当埋头实验几月找到了目标基因片段，电泳时条带却突然消失了；千辛万苦分离纯化的物质，色谱图中却意外出现杂质峰，苦苦查询，可能仍找不到问题原因。若问题只在小小的吸头上，科研君的心还能淡定吗？ 吸头的问题在哪里，如何保证纯净无污染的吸头？需要考虑以下几方面因素： 一、 吸头材质 吸头市场上，原材料基本都是聚丙烯塑料（低吸附，化学惰性高，使用温度范围广，无色透明）。也许大家不知道的是，同样是聚丙烯，品质会有大的差别。高品质的吸头一般采用天然 100% 纯聚丙烯，而低廉的吸头则很多
： （1）移液枪：200ul、10ul （2）吸头：200ul、20ul （3）EP管1.5ml、100ul （4）水浴箱 2，实验器具的处理与准备 塑料制品：（包括吸头、EP管等） 将塑料制品逐个浸泡于1‰DEPC水中（必要时小枪头需要用吸管打入DEPC水）37℃过夜，然后送至高压3次，后在80℃烘烤箱中烘干（或置于37℃中8小时左右烘干），试验前将枪头放入吸头台。 3，试剂配制和准备： （1）DEPC水：泡实验器具的DEPC水的配制：1000ml双蒸水中加1mlDEPC，放在1000ml
水相（离心后，混合物将分离为底层为浅红的、中层为酚-氯仿相、上层为无色的水相。RNA包含在水相中，水相的体积约相当于所加的Trizol试剂量的60%）于一新的离心管，按每1 mlTrizol液加0.5 ml异丙醇的比例加入异丙醇，室温（15 ℃～30 ℃）放置10分钟，12000 g（2 ℃～8 ℃）离心10分钟。 4. 弃去上清液（RNA沉淀为一层如凝胶样透明的小块附在管底和管壁），按每1 ml Trizol液加入至少1 ml的比例加入75%乙醇进行洗涤，涡旋
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