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- 文献和实验
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234
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北京鼎国
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箱
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文献和实验液体培养基,挑单克隆于离心管中,37℃,250rpm,培养过夜。 3.第三天取200µl小摇后的菌液接种于250ml 含AMP的LB液体培养基中,37℃,250rpm培养6 hr左右,使OD值达到0.6-0.8。 4.将菌液移入250ml离心管中, 4℃,3000rpm,离心15min。取出离心管,菌团朝上倒掉上清,将离心管倒置于吸水纸上使上清充分滤干。(注意离心前需配平) 5.加入10ml溶液Ⅰ(50mM Glucose , 25mM Tris-HCl,10mM EDTA, pH8.0),加入RNase
. Carefully open the tubes and place on the Biomek tablet.. 4. The Biomek will distribute two 250 ul aliquots of viral supernatant per sample into the wells of a 96-well flat-bottomed microtiter plate (Dynatech). The Biomek then will add 50 ul of 20% PEG
D. 室温下,离心收集菌体(1500 r/min,5 min),重悬于10 mL Solution I中; E. 再次离心,弃尽上清,菌体沉淀重悬于1 mL Solution II中; F. 将制备的感受态细胞分装为50 µL/管,直接用于转化或-80℃保存备用。 2) 重组载体对酵母的转化 A. 室温下融化一管酵母感受态细胞,加入1 µg重组质粒,轻轻混匀,注意加入DNA溶液的体积不要超过
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