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222
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北京鼎国
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箱
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文献和实验过夜。 (3)在PBS(0.1mol/l Ph7.2)中浸5~10min。 (4)浸于0.1mol/L甘氨酸―PBs 液内5min。 (5)为增强组织通透性,将载片置于0.3%Triton X-100(在PBS内)10~15min。 (6)PBS洗3×5min。 (7)在蛋白激酶K(1μg/ml)溶于Tris �HCl (0.1mol/L, pH8.0)和EDTA(50mmol/L,pH8)中37℃20min。也有用蛋白激酶K溶液,不加
超过一个月。如果一次无法用完一 瓶,可将40~45 ml 分装于无菌50 ml 离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10 %,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。 2.一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。 3.瓶装(500ml) 血清解冻步骤(逐步解冻法): -20℃ 或–70℃ 至4℃冰箱溶解一天,至室 温下全溶后再分装,一般 50 ml 无菌离心管可分装40~45 ml。在溶解过程中须规则
(5)为增强组织通透性,将载片置于0.3%Triton X-100(在PBS内)10~15min。 (6)PBS洗3×5min。 (7)在蛋白激酶K(1μg/ml)溶于Tris HCl (0.1mol/L, pH8.0)和EDTA(50mmol/L,pH8)中37℃20min。也有用蛋白激酶K溶液,不加EDTA的。 (8)浸入新鲜配制的4%多聚甲醛(在PBS0.1mokl/L,pH7.2)3min以终止消化作用和再固定。 (9)浸入新鲜配制的含0.25%(V/V)三乙
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