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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
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220
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北京鼎国
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箱
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文献和实验上清液。 8、加入 Hank’s液 5ml，冲散细胞，再离心一次，弃上清液。 9、加入培养液 l—2 ml（视细胞量），血球计数板计数。 10、将细胞调整到 5×105/ml左右，转移至 25ml细胞培养瓶中，37℃下培养。 上述消化分离的方法是最基本的方法，在该方法的基础上，可进一步分离不同细胞。细胞分离的方法各实验室不同，所采用的消化酶也不相同（如胶原酶，透明质酶等）。 （二）组织块直接培养法 自上方法第 3步后，将组织块转移到培养瓶，贴附与瓶底面。翻转瓶底朝上，将培养液加至瓶中，培养液勿接触组织
过夜。 （3）在PBS（0.1mol/l Ph7.2）中浸5～10min。 （4）浸于0.1mol/L甘氨酸―PBs 液内5min。 （5）为增强组织通透性，将载片置于0.3%Triton X-100(在PBS内)10～15min。 （6）PBS洗3×5min。 （7）在蛋白激酶K（1μg/ml）溶于Tris �HCl (0.1mol/L, pH8.0)和EDTA（50mmol/L,pH8）中37℃20min。也有用蛋白激酶K溶液，不加
过夜。 （3）在PBS（0.1mol/l Ph7.2）中浸5～10min。 （4）浸于0.1mol/L甘氨酸―PBs 液内5min。 （5）为增强组织通透性，将载片置于0.3%Triton X-100(在PBS内)10～15min。 （6）PBS洗3×5min。 （7）在蛋白激酶K（1μg/ml）溶于Tris �HCl (0.1mol/L, pH8.0)和EDTA（50mmol/L,pH8）中37℃20min。也有用蛋白激酶K溶液，不加
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