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- Amresco
- USA
- M329-10ML
- 2025年07月15日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
TOTAL PROTEIN CELL LYSIS BUFFER
- 库存：
大量
- 供应商：
上海瑶韵生物
- 规格：
M329-10ML
AMRESCO产品价值平台：创新 + 质量 = 价值 便利 省时 高性能 高质量 安全 先进技术 经济（性价比高）
AMRESCO产品介绍: 产品服务于生物科研，包括分子生物学，蛋白组学，细胞生物学等领域；电泳，检测，细胞培养等技术。
核心产品：琼脂糖系列，丙烯酰胺系列，缓冲液系列，表面活性剂系列，抗生素系列，专业产品等（蛋白酶 K,IPTG,X-gal）
新产品介绍：NEXT GEL家族系列产品，蛋白荧光染料，磷蛋白染色试剂盒，DNA荧光染料，蛋白酶抑制剂混合物，细菌冻存用培养基等。
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文献和实验器上）2 小时。3. 4 ℃ 下在微型离心机中以 16000 × g 离心 20 分钟。轻轻地从离心机中取出离心管，置于冰上。将上清液转移至放置在冰上的新离心管中。弃去沉淀。二、样品制备1. 取出小部分 (50 μL) 裂解物，用于蛋白分析。确定每种细胞裂解物的蛋白浓度。2. 向剩余体积的细胞裂解物中加入等体积的 2× Laemmli 样品缓冲液。我们推荐采用以下方法来还原样品和使样品变性，除非在线抗体数据表指明应使用非还原和非变性条件。3. 还原和变性：在 100 ℃ 下将样品缓冲液中的每种细胞裂解物煮沸
获细胞，加入适量细胞裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂），冰上裂解 30 min，细胞裂解液于 4 ℃，最大转速离心 30 min 后取上清； 取少量裂解液以备 Western blot 分析，剩余裂解液加 1 μg 相应的抗体加入到细胞裂解液，4 ℃ 缓慢摇晃孵育过夜； 取 10 μl protein A 琼脂糖珠，用适量裂解缓冲液洗 3 次，每次 3 000 rpm，离心 3 min； 将预处理过的 10 μl protein A 琼脂糖珠加入到和抗体孵育过夜的细胞裂解液中 4 ℃ 缓慢摇晃孵育
[3] 将细胞裂解物分离成 RIPA 可溶性和 RIPA 不可溶性组分，发现在两个组分中都可以检测到 TDP-43 的磷酸化片段。同样的，用 RIPA 缓冲液裂解小鼠 MEC 细胞时，磷酸化的 EGFR（pY-1068 EGFR）只在 RIPA 可溶性组分中检测出。然而，磷酸化的 c-Src（pY-416 c-Src）则在 RIPA 可溶性和 RIPA 不可溶组分中都能检测出， 甚至 WT 样品在 RIPA 不可溶组分中的信号比 RIPA 可溶性组分中更强（下图），结果表明如果仅使用 RIPA 可溶性组分
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