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西宝生物
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Eag I5′...C/GGCCG...3′
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500 U
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BIOCHEMICALS
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文献和实验分析.4、几个概念：（1）扩增曲线 ：（2） 荧光阈值：（3）Ct值：CT值的重现性：5、定量原理：理想的PCR反应： X=X0*2n非理想的PCR反应： X=X0 (1+Ex)nn：扩增反应的循环次数X：第n次循环后的产物量X0：初始模板量Ex：扩增效率5、标准曲线6、绝对定量1）确定未知样品的 C(t)值2）通过标准曲线由未知样品的C(t)值推算出其初始量二、实时荧光定量PCR的几种方法介绍 方法一：SYBR Green法 （一）工作原理 1、SYBR Green 能结合到双链DNA的小沟
Adv Sci：林戈/薛愿超合作阐明 eIF4E1B 在哺乳动物卵母细胞向胚胎转换过程中母源 mRNA 选择性翻译的作用机制
3′UTR 结合蛋白选择性募集 5′UTR 富含 CCGCC 序列的 mRNA（图 A），激活其在卵母细胞向胚胎转换过程中的翻译，以参与卵子发生，卵母细胞成熟，受精及早期胚胎发育等关键事件（图 B, C）。这一重要工作为将来挖掘参与哺乳动物卵母细胞向胚胎转换过程中的关键蛋白提供了参考，同时也将为研究人类卵母细胞向胚胎转换过程中的母源 mRNA 翻译调控奠定了坚实的基础。 中信湘雅生殖与遗传专科医院副研究员郭静，博士后张珏及中科院生物物理所的博士生赵海莲为本文第一作者。该研究受到国家重点研发
fragments prior to internucleosomal fragmentation. J. Biol.Chem. 268, 3037-30392. DNA Ladder 测定方法：收获细胞（1′107）沉淀，细胞裂解液，13000rpm′5min, 收集上清，1%SDS和RnaseA（5mg/ml）56°C，2h，蛋白酶K（2.5mg/ml）37°C，2h，1/10体积3M醋酸钠和2.5倍体积的冷无水乙醇沉淀DNA，4°C过夜，14000rpm′15min，最后将沉淀溶解在TE buffer中
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