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6个月
- 英文名:
T4 RNA Ligase
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大量
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上海信裕
T4 RNA Ligase
BR
产地 中国/美国/德国
所在目录 酶类
产品性质及属性
分子量 43.6kDa,单体
级别 BR
来源 含有T4噬菌体克隆基因63的大肠杆菌
T4 RNA连接酶浓度 10u/ul
活性定义 是指在37℃、30分钟内将1nmol 5'-[32P]-(A)12-18转化为磷酸酶抗性形式所需的酶量
酶活性分析混合物 50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 10uM 5'-[32P]-(A)12-18(10uM 5'-末端)
保存液组分 20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT,0.1mM EDTA,0.5mM ELUGENT变性剂和50%(v/v)甘油
10×反应缓冲液 500mM HEPES-NaOH(PH8.0,25℃), 100mM MgCL2, 100mM DTT
抑制剂 金属螯合剂、SH基团修饰试剂
失活 70℃加热10分钟
质量控制 测试表明无内切和外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染
备注 反应体系中ATP的浓度取决于连接反应的类型,推荐的BSA反应浓度是0.1mg/ml
T4 RNA连接酶性状 重组酶,催化ATP依赖的分子内和分子间磷酸二酯键连接(5'-磷酸基团和3'-羟基末端),底物分子为多聚核苷酸、寡核苷酸、ssRNA和ssDNA,分子之间的最小的连接底物是核苷3',5'-二磷酸,而分子内连接的最小底物是8个碱基的寡核苷酸。配套提供反应缓冲液、ATP和BSA溶液。催化3'→5'磷酸二酯键的形成,使核苷酸的5'-磷酸末端和5'-羟基末端连接。作用底物包括单链RNA、DNA及二核苷焦磷酸。随酶提供10X 反应缓冲液
用途 生化研究。连接RNA和RNA ;RNA3'-末端标记胞嘧啶3',5'-双[a-32P]磷酸; tRNA的特异性修饰;合成寡核苷酸的环化;寡聚脱氧核糖核苷酸与单链cDNA连接,用于5'RACE(快速扩增cDNA末端)分析
保存 -20°C
XYP102460 (S)-(+)-1-苯基-1,2-乙二醇对甲苯磺酸酯, 98%
XYD123085 (R,R)-DACH-萘基 Trost 配体, 95%
XYD123104 (S,S)-DACH-萘基 Trost 配体, 95%
XYD123112 (R,R)-DACH-苯基 Trost 配体, 95%
XYD123138 二氯[(R)-(+)-2,2′-二(二苯基膦)-1,1′-联萘基][(1R,2R)-(+)-1,2-二苯基乙二胺)钌(II), 98%
XYL115664 (R,R)-2,2'-异亚丙基双(4-苯基-2-恶唑啉), 97%
XYL115665 (S,S)-2,2'-异亚丙基双(4-苯基-2-恶唑啉), 97%
XYL115670 (S,S)-(-)-2,2'-异亚丙基双(4-叔丁基-2-恶唑啉), 98%
XYL119038 L-(-)-α-氨基-ε-己内酰胺盐酸盐, 97%
XYB102457 (R)-5-溴甲基-2-吡咯烷酮, 96%
XYB117999 (S,S)-(+)-N,N′-双(3,5-二-叔丁基亚水杨基)-1,2-环已二胺, 98%
XYB118000 (R,R)-(?)-N,N′-双(3,5-二叔丁基亚水杨基)-1,2-环已二胺, 96%
XYB119132 (R)-4-苄基噻唑啉-2-硫酮, 97%
XYB123140 (R)-[2,2′-双(二苯基膦)-1,1′-联萘]二氯化钌, 95%
XYM102467 (S)-(-)-2-氯丙酸甲酯, 98%
XYM107988 (S)-(+)-扁桃酸甲酯, 98%
XYM107989 (R)-(-)-扁桃酸甲酯, 98%
XYM109342 D-苹果酸, 99%
XYI103166 (RS)-1H-吲哚-2-羧酸, 97%
XYI115487 S-(-)-吲哚啉-2-羧酸, 99%
XYI119118 (R)-吲哚啉-2-羧酸, 97%
XYI121115 (R)-(-)-4-异丙基-3-丙酰基-2-恶唑烷酮, 98.0%
XYI121117 β-6'-羟基异辛可宁, 98.0%
XYI121118 (4R)-(+)-异丙基-5,5-二苯基-2-恶唑烷酮, 98.0%
XYI121119 (4S)-(-)-异丙基-5,5-二苯基-2-恶唑烷酮, 98.0%
XYI121120 (R,R)-(+)-2,2'-异亚丙基双(4-叔丁基-2-恶唑啉), 98.0%
XYI121121 (R,R)-2-碘-1,3-双[1-(均三甲苯基氨基甲酰基)乙氧基]苯, 98.0%
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文献和实验相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶,可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
因为看到园子中使用NEB T4 DNA连接酶的老师和同学比较多,也经常就一些连接的问题进行讨论和沟通。今天发一个关于NEB T4 DNA连接酶的一个专题,就使用过程中一些常见问题跟大家讨论一下。也希望各位老师同学能够踊跃参与,如果大家有什么疑问或者好的建议欢迎。 一、关于NEB M0202 T4 DNA 连接酶的使用方法和常见问题及解答 1、产品特性和使用方法 产品说明:该酶催化契合的双链DNA或RNA的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑
使RNA的 3′- OH末端与 5′ - 磷酸末端以磷酸二酯键而连结的酶。 EC 6. 5. 1. 3.是 J. Hurwitz等( 1972)从感染 T4 噬菌体的大肠杆菌中提取的,与促进该噬菌体尾部纤维结合的基因 63的蛋白质为同一物质。作为其反应机理,首先是酶与 ATP形成酶 - AMP复合体,复合体的 AMP与 RNA的 5′ - 磷酸末端形成焦磷酸键,它与 RNA的 3′- OH末端形成磷酸二酯键将 AMP游离出。一个 RNA链的 5′与 3′末端结合则生成一个环状分子。对基质
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