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- 2026年02月19日
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100
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上海古朵生物科技有限公司
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1ml×10支
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文献和实验录： MgCl2 4ul 10×RNA PCR Buffer 2ul RNase Free dH2O 8.5ul dNTP Mixture(各10mM) 2ul RNase Inhibitor 0.5ul AMV Reverse Transcriptase 1ul Oligo dT-Adaptor Primer 1ul 样品RNA 1ul 30℃ 10min 50℃ 30min 99℃ 5min 5℃ 5min PCR： MgCl2 1.2ul 10×LA RNA PCR
（20 ul）：10×Ex Taq Buffer（Mg2+ Plus）2.0 ul， dNTP Mix（各 2.5 mM）2 ul，任 1 种 SP1 引物（20 uM）1 ul，引物 FP1-4（10 uM）1 ul，DNA 模板 1 ul，Ex Taq 酶（5 U/ul）0.2 ul，dd H2O 补足至 20 ul。Primary TAIL-PCR（25 ul）：10×Ex Taq Buffer（Mg2+ Plus）2.5 ul， dNTP Mix（各 2.5 mM）2 ul，引物 SP
loading tips 吸。 7、含 beads 的 samples 离心时，有的 protocol 上推荐是 1000rpm，45 秒，但可以根据情况调整，但要注意转速不能太快防止beads 破碎。（当然如果采用的是 magnetic 的 beads 就不存在这个问题） 8、reverse crosslink 可以是 65°4 个小时，也可以 overnight。 9、reverse crosslink 后的在进行下面步骤之前建议先离心，把蒸发到离心管盖子上的部分离下来。 10、每次行 real
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