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yuanmu
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上海远慕生物有限公司
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100×100ul
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产品名称:现货供应Top10感受态细胞
货号:YM-F1858-A
规格100×100ul
保存条件:—20℃,避光,6个月
供货能力:现货 作为实验用品,供研究用,不能直接用于人体
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文献和实验本月旧帖整理活动专题: T-A克隆技术 大家可以在以下基础上进行整理或对具体问题进行讨论 (1)如何筛选合适的宿主菌株 ◇ 所选的宿主菌株应对所用质粒的抗生素抗性基因敏感。 ◇ 如进行蓝/白斑筛选,宿主菌β-半乳糖苷酶的α-肽编码区应在染色体或附加体上缺失掉(lacZΔΜ15)。TOP10和DH5α都能用于蓝/白斑筛选。 ◇ 要表达重组蛋白,可使用带有可诱导的T7 RNA聚合酶基因的菌株,如BL21(DE3)。 ◇ 使用pGEM载体克隆大片段时(>7-8 kb),经转化
4℃,14000r/m离心10min。 7.12 弃上清,空气中干燥。 7.13 10μl H2O悬浮细胞。8、转化(要求:4℃预冷) 8.1 冰上融化感受态细胞(感受态细胞的制备见分子克隆啦)Top10f’。 8.2 加100μl转化细胞到预冷的1.5ml离心管中,枪头轻轻吹打混匀。 8.3 冰上孵育30min。 8.4 42℃,45S~50S。 8.5 冰上孵育2min后,加1ml LB。 8.6 37℃,1h,250r/m. 8.7 2500r/m
. 7.13 10μl H2O悬浮细胞. 8、转化(要求:4℃预冷) 8.1 冰上融化感受态细胞(感受态细胞的制备见分子克隆啦)Top10f’. 8.2 加100μl转化细胞到预冷的1.5ml离心管中,枪头轻轻吹打混匀. 8.3 冰上孵育30min. 8.4 42℃,45S~50S. 8.5 冰上孵育2min后,加1ml LB. 8.6 37℃,1h,250r/m. 8.7 2500r/m
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